电镜目前的技术难点及未来发展趋势.pdf

5 冷冻电镜目前的技术难点及未来发展趋势 与其他的结构生物学和生物物理学研究方法类似， 冷冻电子显微学在硬件设备上的长足 进展解决了很多关键性的技术难点， 使该方法的应用普及成为趋势。 同时， 一些其他的技术 难点凸显出来，成为结构解析中的瓶颈，需要更多的关注与投入。 5.1 样品制备技术 样品制备一直是冷冻电子显微学研究的关键步骤。 对于生物大分子结构研究来说， 需要 保证单颗粒分子以合适的密度均匀分布于厚度合适的无序冰中， 才有可能获得良好的电子显 微数据进行结构解析。 由于不同的生物大分子与样品支持膜的相互作用及在水溶液中的性质 各不相同， 分子在样品中的分布状态各异。 目前普遍采用的冷冻制样技术在基本原理上仍然 采用 30 年前发明的方法，实验可重复性、操作可移植性、通用性等都很差。样品制备已经 成为冷冻电子显微学结构解析的限速步骤。 冷冻电子显微学要想成为结构生物学研究的主要 应用手段， 必须在样品制备这一步骤取得重要的突破。类似的，对于