细菌感染的检测方法与防治原则.ppt

* * 负染色法需要使用酸性染料来染色，如伊红或苯胺黑。因为细菌体表面带负电，而酸性染料的色原也带负电，所以色原只能将背景染色。没有染色的细胞在染色背景下就能很容易的观察到。在负染色法中，标本不需要热固定，细胞不会因为化学药物的影响而变形，对于不易染色的细菌或病毒也能观察。 背景染色需用酸性染料如伊红或苯胺黑。因细菌体表带负电荷，而酸性染料之呈色原（ chromogen ）也带负电荷，故不能渗入细胞内。 背景染色之实际应用有二，一为标本不需以热固定，细胞不至因化学药物之影响而变形，可观其自然之大小与型态，二乃可借以观察不易染色之细菌如螺旋菌 * * 多肽疫苗中含佐剂 DNA疫苗为目的基因-真核表达载体 * 第七章 细菌感染的检测方法与防治原则 细菌学诊断 血清学诊断 特异性抗体 第一节 细菌感染的实验室诊断 病原菌 抗原 代谢产物 核酸 采取标本应无菌操作 不同情况（如病期、分布、排出部位等） 采取不同标本。并尽可能采集病变明显 部位的材料 采集标本应在使用抗生素之前 标本必须新鲜，尽快送检，注意冷藏（少 数应保暖） 标本采集与送检的原则 细菌学诊断 细菌形态学检查 显微镜放大法 染色法 普通光学显微镜 电子显微镜 复染色法：用2种以上染料 革兰染色 抗酸染色 负染色法：墨汁负染 荧光显微镜 （掌握－实验课） 细菌分离培养与鉴定 Isolation and identification 细菌的分离培养 生化试验 血清学鉴定 动物试验 药物敏感试验 自动微生物鉴定和药敏分析系统 已知抗体检测未知的纯培养菌 测定细菌毒力 (半数致死量、半数感染量) 药敏试验（纸片法）：根据纸片周围抑菌环大小  决定药敏程度。 凝集试验，ELISA，免疫荧光法，Western blot， 对流免疫电泳 核酸杂交 PCR 基因芯片（gene chips） 细菌抗原的检测 细菌核酸的检测 用已知细菌或特异性抗原检测血清中的有无 相应特异性抗体及其动态学变化。 　　　　适用于抗原性较强的细菌或病程较长的感染 性疾病的诊断。 双份血清　 若恢复期血清抗体效价比早期升高 4倍或4倍以上，有诊断意义。 细菌感染的血清学诊断 第二节 细菌感染的特异性预防 一、人工主动免疫：主要用于预防 （一）疫苗 　　　　死疫苗，减毒活疫苗 　　　亚单位疫苗、基因工程疫苗 　　多肽疫苗、DNA疫苗等 （二）类毒素 　　　 死疫苗与活疫苗的比较 种类 活疫苗 死疫苗 制备特点 减毒或无毒 死菌，保持免疫原性 制备方法 非正常培养 理化方法 接种次数 1次，量小，可在体内增殖，类似轻型感染或隐性感染 2-3次，量大，在体内不增殖，发热或局部肿痛反应等 免疫类型 体液免疫，细胞免疫 体液免疫 免疫效果 好，维持时间长（1-5年） 较差，维持时间短（0.5-1年） 安全性 保存 可能毒力回复 不易保存 好 易保存 免疫原性 二、人工被动免疫：主要用于紧急预防和治疗 抗毒素（含抗体的血清） 免疫球蛋白（正常人血浆中的血清丙种球蛋白等） 细胞因子制剂：IL、IFN-γ、CSF * * 负染色法需要使用酸性染料来染色，如伊红或苯胺黑。因为细菌体表面带负电，而酸性染料的色原也带负电，所以色原只能将背景染色。没有染色的细胞在染色背景下就能很容易的观察到。在负染色法中，标本不需要热固定，细胞不会因为化学药物的影响而变形，对于不易染色的细菌或病毒也能观察。 背景染色需用酸性染料如伊红或苯胺黑。因细菌体表带负电荷，而酸性染料之呈色原（ chromogen ）也带负电荷，故不能渗入细胞内。 背景染色之实际应用有二，一为标本不需以热固定，细胞不至因化学药物之影响而变形，可观其自然之大小与型态，二乃可借以观察不易染色之细菌如螺旋菌 * * 多肽疫苗中含佐剂 DNA疫苗为目的基因-真核表达载体 *