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实习十 血液常规检验（二） 一、实验时间 2学时 二、实验地点 内科诊断实验室 三、目的和要求 掌握白细胞分类计数（DC）的操作技术，了解其临床意义。 四、内容和方法 白细胞分类计数（DC） 1、原理： 　　细胞的染色反应，决定于细胞的化学结构对染色物质的亲和力。将血液制成涂片，经染色后镜检，根据显示各种细胞形态和着色特点，测定血液中各种类型白细胞的百分数。 2、试剂与设备： 瑞氏染色液、磷酸盐缓冲液 、二甲苯、香柏油、载玻片、染色盆及支架、擦镜纸、吸水纸、白细胞分类计数器、显微镜。 3、方法 ①血片的制作：左手持载玻片两端，右手持推片，取被检血一滴滴于载片一端，推片一端与血接触呈45°角，并使其血液自由沿推片边缘扩散，待均匀后，以同等速度轻轻向另一端推动，使血均匀地涂抹在载片上。让其自然干燥，待染。 注意：载玻片必须无油脂、洁净、干燥。否则会影响血细胞形态。 ②瑞氏染色步骤： 将干燥的血片，置于染色架上，滴加瑞氏染液于血片上，并计其滴数，直至将血膜浸盖为止。 待染1～2min 加等量的缓冲液或蒸馏水，并轻轻吹动使其混匀。放置染色5～10min，然后用蒸馏水冲洗，吸干，油镜观察。 注意： 冲洗时应将蒸馏水直接向血膜上倾倒，使液体自血边缘溢出，沉淀物从液面浮去。 切勿先将染液倾去再冲洗，否则沉淀物附着于血膜上不易冲掉。 染色良好的血片呈樱红色 如呈淡紫色，是染色时间过长 如呈红色是染色时间过短。 下页：各种白细胞的形态特征（瑞氏染色法） 嗜碱性白细胞 大单核细胞 思考题 1、临床实验室检查时，如何进行白细胞分类计数？其正常参考值是多少？ 2、白细胞分类计数的参考值的增减变化有何临床意义？ * * ③白细胞分类计数法： 白细胞分类时先用低倍镜观察白细胞的分布 然后滴上香柏油，用油镜观察计数。 采用四角区法计数（在血片的四角各取一点，在此区域内各计数25个，共计100个白细胞） 按各类的白细胞所占有的百分数，计算其比值。 很多，非常细小、淡紫色 无 灰蓝或 云蓝色 很多 存在 细致网状 边缘不齐 淡蓝紫色 豆性 山字形 椭圆形 中心或 偏心性 大单核 细胞 无或有少数嗜亚尼林蓝色颗粒 胞浆深 染 时有 天蓝深蓝 或淡红色 少 致密 大块或 中等块 或致密 深紫蓝色 圆形或 微凹入 偏心性 淋巴细胞 蓝黑色，分布不均匀，大多数在细胞的边缘 无 浅粉红色 多 存在 粗糙 较浅紫蓝色 叶状核 不太清楚 中心性 嗜碱性 白细胞 深红，分布均匀，马的最大，其他动物次之 无 蓝色或 粉红色 多 存在 粗糙 较浅紫蓝色 2～3叶 者居多 中心或 偏心性 嗜酸性 白细胞 粉红色或紫红色 无 浅粉红色 多 存在 粗糙 深紫蓝色 3～5叶 者居多 中心或 偏心性 嗜中性 分叶核 嗜中、嗜酸或嗜碱 无 粉红色 多 存在 细致 浅紫蓝色 马蹄或 蜡肠性 中心或 偏心性 嗜中性 杆状核 红或蓝，细致或粗糙 无 蓝色或 粉红色 中等 不清楚 细致 红紫色 椭圆 偏心性 嗜中性 幼年型 颗粒 透明带 颜色 多少 细胞 核膜 核染色质 颜色 形状 位置 细 胞 浆 细 胞 核 白细胞 种类 嗜碱性白细胞 淋巴细胞 浆细胞 单核细胞 * *