bcl2介导的芹菜素抗心肌细胞缺氧复氧损伤作用.pdfVIP

·１２２· 中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０１５Ｊａｎ；３１（１）：１２２～７ 2014-12-04 13:45/kcms/doi/10.3969/j.issn.1001-1978.2015.01.026.html 网络出版时间：　网络出版地址： Ｂｃｌ２介导的芹菜素抗心肌细胞缺氧／复氧损伤作用 １ ２ ２ ２ ２ ２ １ ２ 周　敏 ，游嘉振 ，何　欢 ，刘　丹 ，廖章萍 ，汤　蕾 ，尹　东 ，何　明 （南昌大学１．第二附属医院江西省分子医学重点实验室、２．药学院江西省基础药理学重点实验室，江西 南昌　３３０００６） ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０１５．０１．０２６ 羟基黄酮，分子式为 Ｃ Ｈ Ｏ。近年来研究发现 １５ １０ ５ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１－１９７８（２０１５）０１－０１２２－０６ ［５］ Ａｐｉ能抑制心肌Ｉ／Ｒ损伤引起的细胞凋亡 、明显 中国图书分类号：Ｒ３３２；Ｒ２８４．１；Ｒ３２９．２４；Ｒ３２９．４１１； ［６］ ［７］ 缩小心肌Ｉ／Ｒ梗死面积 、抗心律失常 ；尚具有 Ｒ８４５２２ ［８］ 减轻脑缺血性损伤 等心血管药理活性，但其对心 摘要：目的　探讨芹菜素（ａｐｉｇｅｎｉｎ，Ａｐｉ）在心肌细胞缺氧／ 肌Ｉ／Ｒ损伤保护作用的具体机制还不很清楚。 复氧损伤中的作用，并阐明Ａｐｉ对心肌损伤的保护作用是否 本文选用大鼠Ｈ９ｃ２心肌样细胞，行缺氧／复氧 主要由Ｂｃｌ２介导。方法　培养 Ｈ９ｃ２心肌样细胞；随机分 （ａｎｏｘｉａ／ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ，Ａ／Ｒ）损伤，经Ａｐｉ预处理产 为正常对照（Ｃｏｎｔ）组、缺氧／复氧 （Ａｎｏｘｉａ／Ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ， 生心肌保护作用后，用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测细胞内Ｂｃｌ Ａ／Ｒ）组、Ａｐｉ预处理组、Ａｐｉ＋ＡＢＴ７３７组。ＭＴＴ法检测细 胞存活率；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测 Ｂｃｌ２表达；比色法检测培养 ２蛋白表达水平；加用 Ｂｃｌ２特异性抑制剂 ＡＢＴ ［９］ 液ＬＤＨ活性、细胞ＳＯＤ及 ＧＳＨＰｘ活性、ＭＤＡ含量；流式细 ７３７ ，探讨Ａｐｉ预处理抗心肌Ａ／Ｒ损伤作用与其 胞仪检测心肌细胞 ＲＯＳ含量、线粒体膜电位及细胞凋亡。 对Ｂｃｌ２蛋白表达水平上调之间的关系及其细胞线 结果　 Ａｐｉ预处理２５ｈ后，心肌细胞Ｂｃｌ２表达呈剂量依赖 粒体功能的影响。 性上调（Ｐ＜００１）；细胞存活率升高，培养液 ＬＤＨ活性降 １　材料与方法 低，细胞ＳＯＤ、ＧＳＨＰｘ活性升高，ＭＤＡ含量与 ＲＯＳ生成减 １．１　受试药品与试剂　芹菜素（Ａｐｉ）：中国药品生 少，线粒体膜电位更为稳定，细胞凋亡减少（Ｐ＜００１）；Ｂｃｌ２ 物制品检定所；ＡＢＴ７３７：Ｓｅｌｌｅｃｋ公司；Ｂｃｌ２抗体、 抑制剂ＡＢＴ７３７则可取消Ａｐｉ的上述心肌保护作用。结论 βａｃｔｉｎ抗体及相应二抗：ＳａｎｔａＣｒｕｚ；蛋白提取试剂