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- 2020-01-23 发布于天津
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介导性shRNA能抑制肺癌细胞中livin沉默基因的表达从而促进SGC-7901细胞凋亡
背景—由于肿瘤细胞抑制凋亡增殖,特定凋亡的抑制因素会对于发展新的治疗策略提供一个合理途径。Livin是一种凋亡抑制蛋白家族成员,在多种恶性肿瘤的表达中具有意义。但是, 在有关胃癌方面没有可利用的数据。在本研究中,我们发现livin基因在人类胃癌中的表达并调查了介导的shRNA能抑制肺癌细胞中livin沉默基因的表达,从而促进SGC-7901细胞凋亡。
方法—mRNA及蛋白质livin基因的表达用逆转录聚合酶链反应技术及西方吸干化验进行了分析。小干扰RNA真核表达载体具体到livin基因采用基因重组、测序核酸。然后用Lipofectamin2000转染进入SGC-7901细胞。逆转录聚合酶链反应技术和西方吸干化验用来验证的livin基因在SGC-7901细胞中使沉默基因生效。所得到的稳定的复制品用G418来筛选。细胞凋亡用应用流式细胞仪(FCM)来评估。细胞生长状态和5-FU的50%抑制浓度(IC50)和顺铂都由MTT比色法来决定。
结果—livin mRNA和蛋白质的表达检测40例中有19例(47.5%)有胃癌和SGC-7901细胞。没有livin基因表达的是在肿瘤邻近组织和良性胃溃疡病灶。相关发现在livin基因的表达和肿瘤的微小分化和淋巴结转移一样(P? 0.05)。4个小干扰RNA真核表
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