分光光度计课件.pptxVIP

主要内容;[目的要求];一、概述;分光光度法 分光光度法（Absorption Photometry）是一种基于物质对光的选择性吸收而建立起来的一种分析方法。包括可见吸光光度法、紫外-可见吸光光度法和红外光谱法等。;分光广度法的优点： 灵敏度高 测定简便快速，仪器设备简单。 不破坏样品;(1) 光的基本性质:电磁波的波粒二象性; h－普朗克(Planck)常数 6.626×10-34J·s ?－频率 E－光量子具有的能量 单位：J(焦耳)，eV(电子伏特) V = E / h;波粒二象性V=c / λ v = E / hc / λ= E / hE=hc/ λ;将光（电磁波）按波长（或频率）顺序排列，即得电磁波谱。 200nm 400nm 760nm 1mm 紫外线 可见光 红外线 不同波长的光具有不同能量，波长越长 （频率越低），能量越小。;; 对溶液来说，溶液呈现不同的颜色，是由于溶液中的质点(分子或离子)选择性的吸收某种颜色的光所引起的。如果各种颜色的光透过程度相同，这种物质就是无色透明的。如果只让一部分波长的光透过，其他波长的光被吸收，则溶液就呈现出透过光的颜色，也就是溶液呈现的是与它吸收的光成互补色的颜色。例如硫酸铜溶液因吸收了白光中的黄色光而呈蓝色； ;2、光吸收的基本定律（Lamber-Beer定律） 单色光通过吸光溶液后，吸光度与溶液 的浓度和厚度之间呈正比关系。 ; （1）Lambert定律： 说明吸收与溶液液层厚度间的关系;Lambert定律：当一适当波长的单色光通过一固定浓度的溶液时，其透射光强度随液层厚度的增加而成指数函数减少，即It=Io*10-k1b 其吸光度与光通过的液层厚度成正比。 式中b为液层厚度，k1为比例系数，它与被测物质性质、入射光波长、溶剂、溶液浓度及温度有关，Lambert定律对所有的均匀介质都是适用的。 ; （2）Beer定律： 说明吸收与溶液浓度间的关系;Beer定律：当一适当波长的单色光通过溶液时，若液层厚度一定，透射光的强度随着溶液浓度的增加而成指数函数减少，即 It=Io*10-k2c 其吸光度与溶液浓度成正比。? 式中c为物质的量浓度(或质量浓度)，k2为与吸光物质种类、溶剂、入射光波长、液层厚度和溶液温度有关的常数。Beer定律仅适用于单色光。 ; 如果同时考虑溶液浓度C 和液层厚度b对光吸收的影响，将Lambert和Beer定律合并，用a取代k1和k2 两个常数则可以推出 It=Io*10-k1b It=Io*10-k2c It=Io.10-abc a为吸光系数，与入射光的波长和溶液的性质有关，为常数； b为液层厚度； c为溶液浓度。 ; 透射光强度It 与入射光强度Io之比称为 吸光度用T表示则 T= It / Io =10-abc T的负对数值定义为吸光度用A表示则 A =-lgT =lg Io/It=abc A（absorbance） 表示吸光率（或吸光度） T（transmittance）表示透光率（或透光度）;分光光度法利用物质的吸收光谱进行分析 吸收光谱（absorption spectrum） 所谓吸收光谱就是用各种不同波长光线测定物质溶液的吸光度，然后按其结果描出吸光度与波长关系的曲线。 吸收光谱是物质的特征性曲线，一种物质在一定的PH、温度、浓度等条件下，具有的一定形状的吸收光谱曲线 ;吸收光谱;吸收光谱体现了物质的特性，是进行定性、定量分析的基础。lmax是定性分析的依据，而溶液的浓度愈大，则吸光度A愈大，是进行定量分析的依据。 ;;光源： 可见和紫外分光光度计装有两种光源灯泡： 钨丝灯，产生可见光； 氢弧（氘）灯，产生紫外线。 由于玻璃吸收紫外线，所以氢弧灯的灯管多用石英制成，或在灯管上设有石英窗。; 色散元件（棱镜或光栅） 单色器： 光狭缝 单色器的作用是将混合光分解（色散），并 可根据需要使一定波长的单色光投射至比色 槽。;光电元件：光电管或光电倍增管 作用：将光能转变成电能。 光电管产生光电流的大小，与光强度和波长有关。 光电管对弱光的灵敏度大，光照过强或长时间曝光灵敏 度