肿瘤细胞与分化凋亡三.pptx

细胞凋亡的生物学意义;细胞凋亡和恶性肿瘤;细胞凋亡干预和肿瘤治疗;细胞凋亡的检测方法;2.丫啶橙染色（acridine orange,　AO)和溴化乙啶(ethidium bromide,　EB)双染法原理：AO和EB都是结合DNA的荧光染料，分别产生蓝色和橙色荧光。其中，AO能透过完整的细胞膜，而EB则只能染色胞膜受损的细胞。因此， AO/EB双染法能借助荧光显微镜或流式细胞仪区分活细胞或早期凋亡细胞和坏死或继发性坏死细胞。 注意事项：应用单一形态学计数凋亡细胞数（凋亡指数，apoptosis index)常受到主观因素的干扰，其个体间甚至同一主体的重复性较差。 ;荧光显微镜观察 ;3 电子显微镜观察法;3 透射电镜观察 ;4 DNA断片法或称琼脂糖凝胶电泳“梯形条带”图谱法;;５.TUNEL法（末端DNA转移酶dUTP缺口末端标记法）;TUNEL检测结果 ;6 PI染色流式细胞术测定凋亡率;2.3 流式细胞仪检测凋亡率;图7 PI/Annexin V双染色检测DADS作用HL-60细胞12h后凋亡率的变化;3.3 流式细胞仪检测凋亡率 ;图12 PI/Anexin-V双染色流式细胞仪检测DADS作用K562细胞12h后凋亡率的改变;;细胞凋亡死亡受体相关信号途径;细胞凋亡死亡受体相关信号途径;Pro-caspase3;Pro-caspase3;Pro-caspase3;细胞凋亡线粒体相关信号途径;Bax;overlay;DADS通过启动Mcl-1/Bid/Bax/Caspase-9/Caspase-3线粒体凋亡通路诱导HL-60和K562细胞凋亡。;MMP开放和caspase活化的“正反馈”环;内源性细胞凋亡抑制物;Bcl－2家族蛋白的结构和功能;MCL1;GAPDH;Time(h) 0 1 2 4 8 24;Quantitation data for Cycling B.FAM/Sybr;Quantitation data for Cycling B.FAM/Sybr;Standard Curve; 总 结 诱导恶性肿瘤细胞分化与凋亡是当前肿瘤研究领域中的热门课题，各种防癌抗癌药物及分化与凋亡诱导剂的出现，为肿瘤的治疗提供了可选择的机会。对恶性肿瘤的分化与凋亡调控机理的研究，可以深入地认识肿瘤发生发展的调控途径，分析恶性肿瘤差异性表达的基因与蛋白，为恶性肿瘤的靶向治疗提供理论依据，这是人类肿瘤治疗的美好蓝图。