荧光定量pcr仪技术原理(罗氏).pdf

荧光定量PCR技术原理 罗氏诊断产品 （上海）有限公司 广州办事处 应用科学\分子诊断部 应用专员 胡旭霞 Xu_xia.hu@ Roche Applied 1 Science 主要内容  PCR与荧光定量PCR区别  荧光定量PCR的检测模式  荧光定量PCR的定量分析  荧光定量PCR的溶解曲线分析 Roche Applied 2 Science 1 Target Amplification No. of No. Amplicon 1 cycle = 2 Amplicon Cycles Copies of Target 2 cycle = 4 Amplicon 1 2 3 cycle = 8 Amplicon 2 4 4 cycle = 16 Amplicon 3 8 5 cycle = 32 Amplicon 4 16 5 32 6 cycle = 64 Amplicon 6 64 20 1,048,576 7 cycle = 128 Amplicon 30 1,073,741,824 Roche Applied 3 Science 实 时 荧 光定量PCR技术 指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积 累实时监测整个PCR进程，以外参或内参为标准，最后 通过标准曲线对起始模板量进行定量分析的方法。 Roche Applied 4 Science 2 普通 PCR和qPCR 区别 普通 PCR 荧光定量 PCR 在PCR反应的平台期检测， 在PCR反应的对数期检测， 分析终点产物