血红蛋白与核黄素凝胶层析分离电液.pptVIP

* 血红蛋白与核黄素的凝胶层析分离电液 实验目的 （1）掌握凝胶层析的原理。 （2）掌握柱层析的基本装置。 （3）熟悉凝胶层析的操作过程。 层析技术 层析技术的概念： 任何层析都有两层:固定相与流动相，两相互不溶。 固定相由层析介质组成，可以是固体或液体。 这些物质能与待分离的化合物进行可逆的吸附，溶解于交换作用，对层析的分离效果起关键作用。 流动相只在层析过程中推动固定相上待分离的物质朝着一定方向移动的液体或气体。柱层析中流动相一般被称为洗脱剂。它也是层析中的重要影响因素之一。 层析法的特点： 具有高分辨效力 具有高分析效率 具有高灵敏度 应用广泛 局限性： 在定量分析中需要纯制的标准物质 不能精确地解决物质的化学结构问题 实验原理 （1）常用的层析方法： （2）本实验要求用Sephadex G-25 凝胶层析柱将血红蛋白与核黄素的混合液分离，并测出洗脱曲线。 常用的层析方法 凝胶层析 离子交换层析 亲和层析 吸附层析 分配层析 血红蛋白与核黄素 血红蛋白 结构 ：血红蛋白（Hb）是由两对珠蛋白肽链和 4 个亚铁血红素构成。珠蛋白 4条肽链（α、β链）；亚铁血红素：原卟啉、铁。 特点 ：（1）正常情况下