细胞增殖调控.pptxVIP

第一节 细胞增殖调控;一、MPF的发现及其作用;一、MPF的发现及其作用;M期细胞与G1（A）、S（B）和G2（C）期细胞融合诱导早熟染色体凝缩（PCC）（图14-1）;成熟卵细胞细胞质移植发现成熟促进因子的存在：两位科学家分离出第Ⅳ期等待成熟的非洲爪蟾卵母细胞，并用孕酮进行体外刺激，诱导卵母细胞成熟，然后进行细胞质移植实验，他们发现，在成熟的卵细胞的细胞质中必然有一种物质可以诱导卵母细胞成熟，即成熟促进因子（MPF）；后来还证明，在成熟卵细胞中，MPF已经存在，只需通过翻译后修饰即可转化为活性状态的MPF。 1998年分离获得了MPF：1998年，科学家们以非洲爪蟾卵为材料，分离获得了微克级的纯化MPF，并证明其主要含有p32和p45两种蛋白，并且是一种蛋白激酶。;非洲爪蟾卵细胞成熟过程（Ⅰ~Ⅵ）、受精和第一次卵裂示意图（图14-2）;成熟卵细胞细胞质移植发现成熟促进因子（ MPF ）的存在（图14-3）;二、p34cdc2激酶的发现及其与MPF的关系;三、周期蛋白;三、周期蛋白;周期蛋白含量随细胞周期的变化;部分周期蛋白分子结构特征（图14-4）;细胞周期蛋白的降解盒与降解途径;部分哺乳动物（A）和酵母细胞（B牙殖和C裂殖）周期蛋白在细胞周期中的积累及其与CDK活性的关系（图14-5）;四、CDK和CDK抑制因子;四、CDK和CDK抑制因子;通过PCR技术测定与CDK1类似的CDK蛋白分子图解（图14-6）;不同类型的周期蛋白;周期蛋白-周期蛋白依赖型激酶复合物在真核生物细胞周期调控中的作用 ;Cyclin的周期性变化;植物细胞周期控制的图示 ;p21抑制作用的机理 ;五、细胞周期运转调控;（一）G2/M期转化与CDK1的关键性调控作用;（一）G2/M期转化与CDK1的关键性调控作用;cyclin B在CDK1活性调节过程中的作用（图14-7）;CDK1激酶活性综合控制示意图（图14-8）;活性MPF的正反馈 ;（二）M期周期蛋白与细胞分裂中期向后期转化;（二）M期周期蛋白与细胞分裂中期向后期转化;后期促进复合物（ APC ）作为有丝分裂的终结者;马达蛋白和微管系统共同协作导致染色体分离;Cyclin B的降解途径;（三）G1/S期转化与G1期周期蛋白依赖性CDK;（三）G1/S期转化与G1期周期蛋白依赖性CDK;Cyclin D与CDK结合使Rb释放结合的转录因子E2F;p53和Rb在细胞周期调节中的作用 ;G1期周期蛋白是到达S期的一定阶段通过SCF泛素化途径降解的，同时需要G1期CDK的参与：SCF （Skp-cullin-F-box protein）（间期初级活化因子）是一种具有泛素连接酶（E3）功能的多亚基的蛋白复合物（Skp1、Cul1和Rbx1），可以被Skp2、β-Trcp或Fbw7三种F-box蛋白分别活化，而且SCF的底物特异性的识别是由F-box蛋白来决定的；SCF通过降解细胞周期的不同时期的不同的底物从而在整个细胞周期中都发挥作用（但主要在细胞间期G1、S和G2期发挥作用），如降解① G1期周期蛋白（cyclinA、D1和E）（PEST序列对降解起促进作用），② CKI（p21、p27和p57），③ DNA复制调控因子（ORC1和Cdt1）和 ④其它（cdc25a、Wee1和Emi1）。 APC主要在M期和G1期早期发挥作用：APC的2个负责底物识别的因子是cdc20和Cdh1，APC催化的底物见图14-9。;间期初级活化因子（ SCF ）和后期促进复合物（ APC ）在细胞周期中的活动;APC和SCF在细胞周期中的活性及其底物（图14-9）;SCF泛素化依赖蛋白质降解途径（图14-10）;其它对DNA复制起始活动进行综合调控的因素： DNA复制的起始并不仅仅是在G1期末的起始点（限制点）处才决定的。早在G1期开始时，许多与DNA复制有关的物质即已表达并与染色质结合，开始了DNA复制的起始调控。 ①ORC（复制起始点识别复合物）： ORC识别DNA复制起始点并与之结合，这是DNA复制起始所必需的；②cdc6和cdc45也是DNA复制所必需的调控因子：cdc6在G1期早期与染色质结合，到S期早期从染色质上解离下来；cdc45约在G1期晚期才与染色质结合，CDK6对cdc45 于染色质的结合起促进作用；;③DNA复制执照（licensing）因子—Mcm蛋白（minichromosome mantenance protein）：在M期，胞质中的执照因子Mcm蛋白（DNA解旋酶）与染色质接触并与之结合，使染色质获得DNA复制所必需的“执照”，但随着DNA复制进程“执照”信号会不断减弱直到消失，只有等到下一个M期重新获得“执照”，才能开始新一轮的DNA复制。 DNA复制起始调控是近十年细胞周期调控研究中的