实验八、巨噬细胞酸性磷酸酶显示.pptVIP

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  • 2020-04-24 发布于中国
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实验八、巨噬细胞酸性磷酸酶显示 组织化学(histochemistry)和细胞化学(cytochemistry) 是在组织切片上或被检材料上,加一定试剂,使它与组织或细胞中待检物质发生化学反应成为有色沉淀物,以用光镜观察,若为重金属沉淀,可以用电镜观察,称电镜组织化学(electron microscope histochemistry)。这种方法可用于检测细胞内的酶类、糖类、脂类、核酸与某些金属元素等。如进一步应用显微分光光度计等测定标本中沉淀物的强度,则能较精确地进行定量研究。 1. 糖类显示法 最常用的显示方法是过碘酸-雪夫反应(periodic acid Schiff,PAS反应)。 基本原理是:糖被强氧化剂过碘酸(HIO4)氧化后,形成2-醛基;后者与Schiff试剂中的无色品红亚硫酸复合物结合,形成紫红色反应产物,PAS反应阳性部位即表示多糖的存在。 2. 酶类显示 酶的显示法是通过显示酶的活性来表明酶的存在,而不是酶的本身。 将具有酶活性的组织放人含有一定底物的溶液中孵育,底物经酶的作用形成初级反应产物,它再与某种捕捉剂相反应,形成显微镜下可视性沉淀,即最终反应产物。 3.脂类显示 脂类物质包括脂肪与类脂。 标本可用甲醛固定、冷冻切片、用油红、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅵ、苏丹黑B、尼罗蓝等脂溶性染料染色;亦可用锇酸固定兼染色,脂类呈黑色。 4.核酸显示法 显

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