BiacoreT200分子互作分析系统操作应用培训资料.PDF

GE医疗中国 Biacore T200分子互作分析系统 操作应用培训资料 GE梦想启动未来 目 录 一 系统基本操作1 1.1 开机操作1 1.2 缓冲液的放置1 1.3 芯片的放置1 1.4 放置试管架2 1.5 响应信号的归一化处理3 1.6 温度设置4 二 配体的偶联5 2.1 运行手动模式5 2.2 配体的预富集5 2.3 手动模式数据图的分析6 2.4 偶联配体8 2.5 偶联结果分析12 三 芯片表面测试和再生条件选择13 3.1 芯片表面测试13 3.2 再生条件选择15 四 测定亲和力和动力学（多循环）18 4.1 设置多循环动力学18 五 捕获法和单循环动力学21 5.1 捕获法21 5.2 单循环动力学22 六 数据分析27 6.1 数据的导入和检查27 6.2 亲和力和动力学数据分析29 七 设备维护34 7.1 芯片的保存34 7.2 Desorb和Sanitize34 7.3 系统检测 System Check 35 7.4 关机程序 Shut down37 一 系统基本操作 在本练习中，我们将学习如何开启设备、正确放置实验所需的试剂和缓冲液、放取芯片和试管架、冲洗流路系统 以及响应信号归一化处理。当系统更换缓冲液或者芯片后，必须运行Prime程序。Prime时缓冲液会冲洗整个流路系统， 为下一步的实验做好准备。 1.1开机操作 1) 打开Biacore T200系统和电脑的电源开关。Biacore T200的电源开关位于系统背面的左下角。开机后，需等待检测单 元的温度达到预设温度（用户自设，通常为25℃）。待温度稳定后，面板上的温度指示灯（黄色）会停止闪烁，该 过程可能需要30-60分钟。 2) 打开Biacore T200 控制软件（Strart→Program→Biacore→Biacore T200 Control Software），运行后软件程序会自动 和主机系统建立连接。 3) 准备运行缓冲液。本练习采用10X HBE-EP+缓冲液（已经0.22μm膜过滤）：量取50ml 10XHBS-EP+缓冲液、450ml去 离子水，混匀后放入500ml缓冲液瓶。 1.2缓冲液的放置 1) 将已经配制好的缓冲液放在T200系统左侧的缓冲液托架上，换上黑色的单孔盖。 2) 将缓冲液进液管A （注意软管上的蓝色标签）插入至缓冲液瓶底部。其余三根进液管（B、C和D）放在左侧的 舱门后。在实验中，Biacore T200最多支持4种缓冲液；只使用一种缓冲液时，进液管默认为A管。 3) 将2L的废液瓶放置在T200系统右侧的缓冲液托架上，连接上专用的盖子。 4) 取500ml去离子水装入500ml缓冲液瓶，放置在右侧缓冲液托架上，并将进液管A插至瓶底。瓶中的水将用于 清洗进样针。 1.3 芯片的放置 1) 点击工具条中的 按钮或选择Tools菜单中的Insert Chip选项，打开芯片舱门。 2) 如果已经有芯片在芯片舱内，点击工具条中的 按钮或选择Tools菜单中的Eject Chip选项。 点击Eject Chip，流动池中的液体将被排空，随后芯片舱门将自动打开。 3) 如果使用的是新芯片，选择New Chip。在Chip Type的下拉菜单中选择对应的芯片种类，在Chip Id中填入和芯片 相关的实验信息，Chip lot No.中可填入芯片批号（选填）。如果是已经使用过的芯片，请选择Reuse Chip，并在Chip Id下拉菜单中找到与之相对应的芯片信息。 1 4) 手持芯片，有字的一面朝上。按照芯片上的箭头方向，将芯片轻轻推入卡槽，最后合上芯片舱的舱门。 芯片的放置方法 5) 点击Dock Chip按钮，芯片置入后系统将自动转入待机（Standby）状态。 6) 选择Tools→Prime命令，点击Start。缓冲液会以较高的流速