理学黄牛mtdnacytb进化分析综合实验.pptxVIP

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文献研究分析引入 本实验流程介绍 实验要求;文献研究分析引入;;;;;;;;;;本实验流程介绍;黄牛血样/组织样品的采集 DNA样品的制备及检测 引物(primers)设计:primer primer5.0 PCR反应液制备 PCR反应及PCR产物检测 PCR产物的凝胶回收(产物不好的情况下) DNA序列测定 DNA序列的进化分析;黄牛血样的采集;DNA样品的制备及检测;引物(primers)设计:primer primer5.0;PCR反应液制备与反应;PCR反应程序: 94 ℃预变性4 min 94 ℃变性30 s 5 ℃退火30 s 72 ℃延伸1 min (循环30-35次) 72 ℃充分延伸7 min 4 ℃保存;Bio-Rad的MyCycler;PCR产物检测-琼脂糖凝胶电泳法;制作: 称取适量的琼脂糖粉0.2g,量取25ml电泳缓冲液(0.5-1.0ΧTBE),混匀;电热套上加热至沸腾至均匀;拿出凉至约60 ℃(手背感觉不太烫),加1.0μLEB溶液,混匀;迅速倒入胶槽(如有气泡将气泡赶出);凝固约30min,点样,80-100V电泳约1h。凝胶成像系统拍照。;;;DNA序列测定及分析;;实验要求;注意安全 必须穿着实验服 严禁大声喧哗 以小组为单位,充分体现互助协作 注意实验室的卫生 写作综合实验报告(上交纸质版和电子版):下学期第一学期末收齐上交(以班为单位)。

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