PCR基因扩增仪的分类和结构.pptxVIP

聚合酶链反应基因扩增仪的分类和结构;普通PCR扩增仪; 1.普通的PCR仪：一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪，又叫传统的PCR仪。 用途：主要是做一些简单的、对单一退火温度的目的基因进行扩增。; （1）梯度PCR仪： 一次PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度)，通常为12种温度梯度的普通PCR仪。 用途：研究未知DNA退火温度的扩增。; （2）原位PCR：将具有细胞定位能力的原位杂交技术运用于从细胞内靶DNA的定位分析，在细胞内实现基因扩增的普通PCR仪。 用途：用于在细胞的靶DNA所在位置上进行基因扩增。; 2.实时荧光定量PCR仪：PCR扩增时加入的引物利用荧光素进行标记，使引物和荧光探针同时与模板进行特异性结合，扩增结果通过荧光信号采集系统实时采集信号并输送到计算机分析处理系统，实时输出量化结果，这样的PCR仪叫实时荧光定量PCR仪。; 实时荧光定量PCR仪就是在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。; ; （1）水浴式PCR仪： 构成：三个不同温度的水浴槽、机械臂、计算机。 控温方式：半导体传感技术。 由于体积较大、自动化程度低已逐渐淘汰。; （2）变温金属块式PCR仪： 构成：中心由铝块或不锈钢制成的热槽，上有凹孔放置样品管。 控温方式：半导体加热和冷却，计算机控制恒温和冷热处理过程。 ; （3）变温气流式PCR仪： 构成：机壳、热源、冷空气泵、控制器和辅助元件等。 控温方式：半导体加热和冷却，计算机控制恒温和冷热处理过程。 ; ;荧光检测系统 ;;激发光源: ;发光二极管LED: ;Qiagen Rotor-Gene Q定量PCR仪截面图: ; ; （1）金属板式实时定量PCR仪： 可作为普通PCR仪使用; 可带梯度功能 可容纳样本量大，无需特殊耗材。 温度均一性欠佳，有边缘效应，标准曲线的反应条件难以做到与样品完全一致。 ; （2）离心式实时定量PCR仪 温度均一性较好； 使用的是同一个激发光源和检测器，随时检测旋转到跟前的样品，有效减少系统误差； 可容纳样品量少，有的需用特殊毛细管作样品管，增加了使用成本，也不带梯度功能。 ;Light CycleTM荧光定量PCR???结构示意图 ; （3）各孔独立控温的定量PCR仪 不同样品槽分别拥有独立的智能升降温模块，各孔独立控温，适合多指标快速检测。 SmartCyclerⅡ的软件允许一台仪器同时操作六个样品模块，既满足高速批量要求，又能灵活运用，还可实现任意梯度反应。 SmartCyclerⅡ上样不如传统方法方便，而且需要独特的扁平反应管，使用成本较高。