紫外分光光法测定苯甲酸含量.pptxVIP

实验四 紫外分光光度法测定苯甲酸含量仪器分析实验 实验目的1. 了解756CRT型紫外可见分光光度计的结构。2. 了解紫外分光光度法定性的原理和方法。3. 掌握利用756CRT型紫外可见分光光度计测 定苯甲酸含量的原理方和法。实验原理紫外分光光度法(Ultraviolet Spectrophtometry)，主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁，是研究物质电子光谱的分析方法。通过吸收曲线对求知样品进行定性分析。根据朗伯－比耳定律：A=εbc，只要绘出标准曲线，测出试液的吸光度，就可以得到未知样的含量。仪器与试剂1．756CRT型紫外可见分光光度计（上海精仪公司）2．容量瓶（25mL）3．吸量管（5mL）4．苯甲酸（AR）储备液：0.05000g ?L-1 紫外分光光度计的使用1．开机：2 ．吸收池配套性检查3．吸收曲线绘制4．工作曲线的绘制5．样品测定实验步骤1．开机：打开计算机，进入window 98操作系统后，打开仪器开关，点击桌面上的“756CRT”操作软件，“联机”后，系统直接进入初始化窗口。如已初始化过， 系统提示“是否初始化？” 可选择“否”， 则系统进行系统设置后进入工作窗口；也可选择“是”，则系统进入初始化窗口，待仪器初始化结束，进入操作主页面。然后仪器预热20分钟后开始进行测定工作。2. 吸收池配套性检查 石英吸收池在220nm装蒸馏水，以一个吸收池为参比，调节T为100%，测定另一吸收池的透射比，其偏差应小于0.5%，可配成一套使用，记录第二比色皿的吸光度值作为校正值。3．吸收曲线绘制(1)确定波长扫描参数：狭缝宽度：2 nm ；扫描速度：较快；采样间隔：1nm ；测量方式：吸光度 ；绘图方式：重叠；重复次数：1 波长范围：200～350 nm ； 纵坐标：从0---1 存储文件：选择路径和文件名（如E:\学生实验）(2) 基线校正 用蒸馏水作参比进行基线校正，点击“基线校准”开始进行基线校准(3)波长扫描 将盛有苯甲酸标准溶液的比色皿分别放入样品光路，点击“开始扫描” ，得到苯甲酸溶液的吸收曲线，找到最大吸收波长。4．工作曲线的绘制(1) 标准系列的配制 于5支25mL容量瓶中，用5mL吸量管分别加入2.0 ；3.0；4.0；5.0；6.0mL的0.05000g L-1苯甲酸储备液用蒸馏水定容至刻度，摇匀。 标样编号项目12345V（mL）(2) 工作曲线的绘制 进入定量分析界面，按顺序进行标样设定，以所确定的苯甲酸最大吸收波长为测定波长，以蒸馏水为参比，分别测定这五个标准溶液吸光度值，绘制标准曲线，记下工作曲线方程和相关系数。5．样品测定 用2mL 吸量管吸取未知液2mL于25mL容量瓶中，用蒸馏水将其稀释定容，摇匀。将此溶液放在光路上，在仪器上直接进行 样品测定，记下其浓度值。结果记录和数据处理1、工作曲线的绘制 标样编号项目12345V（mL）C(μg/mL)吸光度工作曲线方程相关系数R问题讨论1、紫外可见分光光度法的定性、定量分析的依据是什么？2、紫外可见分光光度计的主要组成部件有哪些？3、设计一个采用分光光度法测定三组分含量的实验方案。