外周血单个核细胞分离复习课程.pptVIP

外周血单个核细胞的分离及活力测定 ;实验原理;人血液中各种细胞的密度如下： 红细胞：1.093 白细胞：1.092 淋巴细胞和单核细胞：1.075-1.090 血小板：1.030-1.035;肝素抗凝全血+等量Hanks液;;; ⒈ 简述补体的概念、分泌细胞及激活途径。 ⒉ 简述补体的经典激活途径的具体过程。 ⒊ 补体结合反应为什么需分两阶段进行？如果将 几种成分反应顺序颠倒，结果会如何？ ⒋ 参加补体结合反应的各已知成分，为什么须预 先滴定？试验中所设计的四种对照管有何意义？ ;用毛细吸管轻轻插入灰白??层，沿管壁轻轻吸出该层的单个核细胞，盛入另一支离心管中。 将所得到的PBMC悬液用5倍体积的Hanks液或RPMI-l640洗涤2次，1500 rpm 5min。;淋巴细胞浓度（细胞数/ml）=四个大方格内细胞数/4×104;台盼蓝染色测定细胞存活率;注意事项;E玫瑰花环试验;原理;原理;E玫瑰花环试验;淋巴细胞功能检测—淋巴细胞转化试验 ;原理;转化的淋巴细胞;意义