第五节-加单氧酶系及其诱导作用.doc

PAGE — PAGE 83 — 第五节 加单氧酶系及其诱导作用 在生物医学领域内，人们对药物在哺乳动物体内经由一定的生化机制进行的生物转化作用，已经给与了极大的关注，对来自哺乳类的细胞色素P450电子传递系统进行了广泛的研究。该系统涉及许多类型药物的氧化作用，例如：芳香及脂肪族化合物的羟基化；N－，O－和S－去烷基化，以及S－和N－氧化作用。Smith和Rosazza详尽地综述和比较了微生物和哺乳类地药物代谢系统，考虑了所有上述提取的反应以及还原和水解转化、结合作用。目前，在微生物和哺乳类代谢系统中最引人入胜的相似点，或许莫过于它们各自的细胞色素P450均一蛋白加单氧酶系。下面就简要地介绍微生物和哺乳类之间这种外线粒体电子传递系统的异同点，目的在于提供一种对于药物代谢研究中运用微生物模型的明晰的生物化学关系。 一、加单氧酶——细胞色素P450的重要性 哺乳类生物转化过程中Ⅰ相反应的三种类型是最普遍最重要的。在过去的二十年间，人们对各种类型化合物氧化机理的了解，取得了惊人的进展。Hayaishi的“氧化酶”一书对氧代谢的总体方面进行了详尽的讨论。此后，围绕着氧的活化，氧化酶类的生理功能等机理研究方面研究了许多复杂问题，下面就是近期工作的小结。 大多数哺乳类氧化Ⅰ相反应，都是由细胞色素P450连接主要位于肝脏的加单氧酶，单也存在于肾脏、肺、胃肠道、脾脏和甾体生源器官，如肾上腺皮质、睾丸、卵巢及胎盘。细胞色素P450实际上是一类涉及多种类型化合物氧化代谢活性体系的均一蛋白质，与这种均一蛋白有关的肝脏混合功能氧化酶。在这一光谱基质的氧化作用中需要NADPH和分子氧。通常肝脏的酶固结在膜上，它们出现在当组织消化和差速离心处理所得到的颗粒性的微粒体部分。肝脏P450系统的颗粒本质和相当的不稳定性，使得难于分离，并在纯净状态下工作。通过精巧的电子传递链，包括均一蛋白P450，一种类似于细胞色素P450还原酶的黄素蛋白的作用下，基质的氧化作用就发生了，也需要一种磷脂，如卵磷脂。除肝脏外的细胞色素P450系统常常是水溶性的，在天然基质的氧化中需要一种非均一的铁硫蛋白和NADH，如：甾体化合物即是如此。当分离得到的细胞色素P450，用连二亚硫酸钠处理，就被还原，再用一氧化碳处理，就在450nm的中心峰产生了一差别吸收峰。这样，由Omura和Sato定名为“细胞色素P450”。后来的研究证明了在多种有机化合物的羟基化期间，在分子氧的活化中均一蛋白质是功能性的。存在着许多非常相关的细胞色素，它们可能彼此通过对一氧化碳的差别吸收谱而区别开，其精细差别出现在最大吸收值446和452nm之间，对所有这些均一蛋白质之间的确切功能差别还不完全了解。人们已经付出了相当的努力来探讨通过这种加单氧酶系催化的、尚未揭示的电子传递过程所伴随的氧化作用。 细胞色素P450加单氧酶结合基质和分子氧，同还原酶先后两步相互作用到活化氧。最终一个氧原子并入基质，另一个氧原子被还原成水。图36就描述了由P450系统所涉及的基质氧化作用系列循环过程。在这一循环中，形成的P450－外来化合物－O2三元络合物阐明从细胞色素P450加单氧酶给与的选择性，在该途径中NADPH－细胞色素P450还原酶涉及两步序列（二电子），如图所示，也发生了NADH的电子转移，NADH的协同作用、细胞色素b5还原酶和细胞色素b5也在图36表示出来。人们提出这些系统的过氧化氢的偶联和解偶联作用。看来NADPH（和NADPH发生系统）可能被过氧化氢和由某些微粒体混合物及某些纯化了的细胞色素，对某些外来化合物的氧化作用中产生的各种有机过氧化物所取代。显然，这种观察还没有被同等的微生物体系所复现。过氧化物的效应可能支持这种假定的P4502+－O2-络合物中间体（见图36）。 图36 外源化学异物经由P－450偶联加单氧酶的氧化作用 图36 外源化学异物经由P－450偶联加单氧酶的氧化作用 人们相信细胞色素P450加单氧酶系作用于哺乳类的脂肪合芳香族的羟基化，N－、O－和S－去烷基化和某些S－和N－的氧化作用。一般而言，我们可设想它们由缺少电子的氧原子对基质起反应。芳香族的羟基化经由芳烃氧中间体而完成。在多数情况下，N－、O－和S－脱烷基化作用是不稳定的，以至于它们同时分解为去烷基基质和一种相应的醛。 二、微生物的细胞色素P450系统 微生物的加单氧酶系也包括细胞色素P450均一蛋白和其它在基质氧化中起本质作用的有关因子。在细菌发现的该酶系同在酵母和真菌中发现的具有很大差别。原核生物看来具有加单氧酶系（即细胞色素P450，黄素蛋白还原酶，非均一的铁硫蛋白），它十分类似于在肾上腺线粒体发现的加单氧酶系，与此相反，真核微生物（酵母和真菌）具有的加单氧酶系更类似于哺乳类肝微粒体中所发现的该酶系。许多微生物细