转基因鉴定与安全性评估.pptxVIP

三、转基因的检测;（一）遗传标记法 在表达载体中安装选择性基因 如对某种抗生素的抗性基因，对某种除草剂的抗性基因等 在表达载体中安装报告基因 转化处理过的受体在相同条件下都能生长，但转化体具有非转化体所不具有的某种特殊表现（称为显性的报告基因），或者转化体不具有非转化体的表现（称为隐性的报告基因）。;1. 利用选择性基因;2．利用报告基因 gus基因、萤火虫荧光素酶基因等，应用较为广泛的是gus基因，即β-葡糖苷酸酶基因。gus基因来自细菌，所编码的β-葡糖苷酸酶，与5-???-4-氯-3-吲哚-β-D葡糖苷酸酯（简称为X-Gluc）的底物发生作用时，能产生蓝色沉淀反应。既可用分光光度计测定，又可直接观察到植物组织由沉淀形成的蓝色斑点;GFP（Green Fluorescence Protein);（二）分子生物学方法检测;1、 DNA水平;;;gDNA提取方法;（1）DNA extraction buffer : final concentration 0.35M sorbitol 63.75g sorbitol(S29) 山梨醇 0.1M Tris 200ml of 1M Tris, pH7.5 5mM EDTA-N