实验十四 酵母蔗糖酶的提取纯化及活力测定.pptVIP

九、附注： ? 比活力 —— 酶的总活力单位数除以总蛋白 mg 数， 即每 mg 蛋白所含有的酶活力单位数。 ? 回收率 —— 每一步 所测得的总 活力数与第一步 总 活力数之比值，以百分比表示。假设第一步 回收率为 100% ? 纯化倍数 —— 每一步 所得的 比活力与第一步 比 活力之比，开始时提纯倍数假设为 1 。 SDS －聚丙烯酰胺凝胶电泳测酶分子量 一、实验目的和要求 1 、了解 SDS的原理； 2 、掌握 SDS测定分子量的方法。 实验十四 酵母蔗糖酶 分离、 纯化 、 活力测定 、 电泳检测 蔗糖酶的提取纯化 一、实验目的和要求： ? 了解离子交换层析的基本原理。 ? 掌握蔗糖酶的提取纯化及离子交换层析的基本步骤。 ? 熟悉有关生化技术的操作方法 。 二、实验原理 ? 蔗糖酶（ β -D- 呋喃型果糖苷 - 果糖水解酶 EC 3.2.1.26 ），是一种水解酶。它催化蔗糖水解为等 量的葡萄糖和果糖。因此，每水解 1 mol 蔗糖， 就生成 2 mol 还原糖。还原糖的测定有多种方法， 如 Nelson 比色法、斐林试剂法等。 ? 本实验用干酵母为原料，通过破碎细胞，热处理， 乙醇沉淀，柱层析等步骤