专题1基因工程（1）作业.docVIP

专题1基因工程（1）作业 1、【2019·全国Ⅰ卷】[生物——选修3：现代生物科技专题] 基因工程中可以通过PCR技术扩增目的基因。回答下列问题。 （1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括________和________。 （2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是________。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是________。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的________。 （3）目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是________。 2、【2019·天津卷】B基因存在于水稻基因组中，其仅在体细胞（2n）和精子中正常表达，但在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响，设计了如下实验。 据图回答： 1.B基因在水稻卵细胞中不转录，推测其可能的原因是卵细胞中 （单选）。 A.含B基因的染色体缺失 B.DNA聚合酶失活 C.B基因发生基因突变 D.B基因的启动子无法启动转录 2.从水稻体细胞或 中提取总RNA，构建 文库，进而获得B基因编码蛋白的序列。将该序列与Luc基因（表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光）连接成融合基因（表达的蛋白质能保留两种蛋白质各自的功能），然后构建重组表达载体。 3.在过程①、②转化筛选时，过程 中T-DNA整合到受体细胞染色体DNA上，过程 在培养基中应加入卡那霉素。 4.获得转基因植株过程中，以下鉴定筛选方式正确的是 （多选）。 A.将随机断裂的B基因片段制备成探针进行DNA分子杂交 B.以Luc基因为模板设计探针进行DNA分子杂交 C.以B基因编码蛋白的序列为模板设计探针与从卵细胞提取的mRNA杂交 D.检测加入荧光素的卵细胞中是否发出荧光 5.从转基因植株未成熟种子中分离出胚，观察到细胞内仅含一个染色体组，判定该胚是由未受精的卵细胞发育形成的，而一般情况下水稻卵细胞在未受精时不进行发育，由此表明 。 3、【2019·江苏卷】图1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒P0具有四环素抗性基因（tetr)和氨苄青霉素抗性基因（ampr）。请回答下列问题： （1）EcoR V酶切位点为，EcoR V酶切出来的线性载体P1为___________未端。 （2）用Taq?DNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段，其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸。载体P1用酶处理，在两端各添加了一个碱基为___________的脱氧核苷酸，形成P2；P2和目的基因片段在__________酶作用下，形成重组质粒P3。 （3）为筛选出含有重组质粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A、B、C三类菌落，其生长情况如下表（“+”代表生长，“﹣”代表不生长）。根据表中结果判断，应选择的菌落是__________（填表中字母）类，另外两类菌落质粒导入情况分别是_____、________________。 菌落类型 平板类型 A B C 无抗生素 ﹢ ﹢ ﹢ 氨苄青霉素 ﹢ ﹢ ﹣ 四环素 ﹢ ﹣ ﹣ 氨苄青霉素+四环素 ﹢ ﹣ ﹣ （4）为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR鉴定。图2所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，PCR鉴定时应选择的一对引物是__________。某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400 bp片段，原因是_______________。 4、下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题: (1) 一个如图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后,分别含有_________个游离的磷酸基团。若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越________。 (2) 用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaI切割,原因是__________。 (3) 与只使用EcoR Ⅰ相比较,使用BamhⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止_________。 (4)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在__________的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。 5、科学家将鱼的抗冻蛋白基因转入烟草，使烟草的耐寒能力大大提高。如图是转基因抗冻烟草培育过程的示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)