放射性配体和受体结合分析实验方法.ppt

药理室讲座 放射性配体与受体结合分析实 验(RBA)方法 刘星华 2011-5-13  内容 ●实验定义与原理 ●实验材料与仪器 实验方法 Scatchard方程与作图(饱和与竞争实验) ●RBA的安全问题 ●实验举例  实验定义与原理 ●定义 放射性配基与受体结合分析简称为受体放射分析 ( radioassay of receptors;它是应用放 素标记配基与特异受体相结合,研究爱 方和受体的数量,以及研究曼体亚型的常用 原理 放射性标记配基(激动剂或拮抗剂)和组织、细 胞,或含有受体的制剂一起温育,使受体和配基 成 用过滤或离心的方法除去未被结合的标记物,测 定滤膜或沉淀物中的放射性,即可计算出和配基 合的受体的量。  RBA的分类 RBA用放射性核素来标记配基,与相应的受体 进行特异性结合反应,可对受体的性质进行定性 和定量的分析。 1、定性RBA:是通过反应的量效关系的变化 来判断受体的类型,单位点或多位点结合 受体与配体结合的特点,反应的可逆性、协作性 等 2、定量RBA:是在已知配体与受体反应性 的基础上 通过结合反应,给出一定量的组织 细胞中能与该放射性配体结合的受体数及结合的 平衡解离常数或结合位点数(最大结合容量)  实验材料与仪器