质粒提取常见问题解析汇报.pdfVIP

实用标准 质粒提取常见问题解析 涂布棒在酒精蘸一下，然后烧一下，能不能保证把所用的菌烧死？ 参考见解： 涂布棒可以在酒精中保藏，但是酒精不能即时杀菌。蘸了酒精后再烧一小会，烧 的是酒精而不是涂布棒。 建议涂布棒还是干烧较长时间后， 冷却了再涂。 同时作多个转化时， 应用几个涂布棒免得交叉污染。 原先测序鉴定没有问题的细菌， 37 ℃摇菌后发现质粒大小或序列出现异常 ? 参考见解：这种情况出现的几率较小，常出现在较大质粒或比较特殊的序列中。解决办法： 1、降低培养温度，在 20 ～25 ℃下培养，或室温培养可明显减少发生概率。 2、使用一些特殊菌株，如 Sure 菌株，它缺失了一些重组酶，如 rec 类等，使得质粒复制更 加稳定。 3、质粒抽提有一个酶切不完全的原因就是溶液Ⅱ中的 NaOH浓度过高造成的， 请大家注意一 下！ 【有两种方法可以在提质粒前判断菌生长是否正常： 1、利用你的嗅觉。只要平时做实验仔细点就能闻出大肠杆菌的气味，新鲜的大肠杆菌是略 带一点刺鼻的气味，