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亚细胞结构分离技术
密度梯度离心法
离心技术
差速离心 differential centrifugation
是指在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心,用于分离不
同大小的细胞和细胞器
密度梯度离心 density gradient centrifugation
是用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度
将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的
作用使细胞分层、分离。
密度梯度离心
速率-区带
slow sedimenting
(R-z)离心法
一 FRACTION
0000000
等密度沉降
9,200%
V=d2:18×(o-s)÷n×O2r
V:是某一时刻样品的沉降速度(厘米/秒)
d:样品颗粒的直径(厘米),我们在初步计算时就假说样品颗粒为球体。非球形
颗粒样品,可以以上式为基础进行修正
样品颗粒的密度(克/米3
s:密度梯度液的密度(克/米3)
n:密度梯度液的粘性系数(克/厘米秒)
O:离心机重轴的旋转角速度(1秒),∞2N:60,N:转/分
r:颗粒所在位置与旋转轴心之间的距离,即离心半径(厘米)
当≈S时V0即样品顺离心力方向沉降
σ〈S时V〈0即样品逆离心力方向上浮
σ-S时=0即样品停止沉降或上浮,稳定在这一位置
用这个公式可以很好地解释在速率一区带离心法或等密度离心法中单一样品的沉降
密度梯度离心
速率-区带
slow sedimenting
(R-z)离心法
一 FRACTION
0000000
等密度沉降
9,200%
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