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紫外吸收光谱法测定苯酚含量
一、实验目的? ???1、了解紫外可见分光光度计的结构、性能及使用方法? ???2、熟悉定性、定量测定的方法二、实验原理? ? 紫外分光光度法,又称紫外吸收光谱法,它是研究分子吸收200.0~800.0nm波长范围内的吸收光谱。紫外吸收光谱主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁,是研究物质电子光谱的分析方法。通过测定分子对紫外光的吸收,可以对大量的无机物和有机物进行定性和定量测定。 苯酚已经被列入有机污染物的黑名单。但在一些药品、食品添加剂、消毒液等产品中均含有一定量的苯酚。如果其含量超标,就会产生很大的毒害作用。苯酚在紫外光区的最大吸收波长λmax=270nm。对苯酚溶液进行扫描时,在270nm处有较强的吸收峰。 定性分析时,可在相同的条件下,对标准样品和未知样品进行波长扫描,通过比较未知样品和标准样品的光谱图对未知样进行鉴定。在没有标准样品的情况下,可根据标准谱图或有关的电子光谱数据表进行比较。 定量分析是在270nm处测定不同浓度苯酚的标准样品的吸光值,并绘制标准曲线。再在相同的条件下测定未知样品的吸光度值,根据标准曲线可得出未知样中苯酚的含量。三、仪器与试剂1.紫外可见分光光度计2.容量瓶(1000ml、250ml、50ml)3.吸量管(5ml、10ml)4.苯酚(AR) 于5支50ml的容量瓶中,用吸量管分别加入0.5 ml、2ml、5ml、10ml、20ml的10ug/ml苯酚标准溶液,用蒸馏水定容至刻度,摇匀。四、最大吸收波长的选择 在标准系列溶液中任取一种,以水为参比,分别在波长200~300nm之间以10为间隔测定其吸光度,在吸光度最大值附近以间隔2nm为单位测定,直至找到最大吸收波长。五、数据记录及结果分析
(1)、标准表
标准溶液编号
250nm
260 nm
270nm
280nm
290 nm
1
0.342
0.714
0.95
0.285
0.0284
2
0.497
1.375
1.93
0.363
0.0313
3
0.505
1.441
2.64
0.359
0.0357
4
0.499
2.646
3.72
0.286
0.0366
5
0.478
3.257
4.62
0.413
0.0349
?(2)、苯酚的吸收曲线图
?(根据上表任意组标准溶液数据作图)
(3)、标准曲线图
标准曲线方程:Y =0 .055+ 0.1515 * X
? 相关系数r=0.9979六、苯酚浓度的测定? ? 在相同情况下,直接测定未知样品的吸光度。根据回归曲线方程计算出待测苯酚浓度。
样品浓度
?测得样品A = 2.44,代人标准曲线方程计算得样品浓度c=13.12ug/ml
七、问题讨论紫外可见分光光度法的定性、定量分析的依据是什么?
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