人感染H7N9禽流感病毒标本采集运送及保存文档.pptVIP

人感染 H7N9 禽流感病毒标本采集、 保存、运送及检测 浙江省疾病预防控制中心 禽 H7 病毒简介 样本采集 标本保存和运输 实验室检测 主要内容 原始标本采集 呼吸道病毒的诊断取决于高质量标本的采集，及其保存运 输等环节。多数标本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次为气管和 支气管分泌物及尸检组织。标本采集后应立即放入适当的采样 液中低温保存。 标本采集人员 医疗机构的医生、护士或疾病预防控制中心专业人员负 责标本采集并填写标本登记表，标本采集人员按照相关要求 做好个人防护。 ? 个人防护设备（ PPE ） 采集前的准备 ? 口罩 (N-95 or N/P/R-100) ? 手套 ? 帽子 ? 鞋套 ? 防护服 ? 防护目镜 ? 采集物品包 采集前的准备 ? 常用的采样液 / 病毒运输液 (VTM ） 采集前的准备 1. pH 7.4 ～ 7.6 的 Hanks 液 2. MEM/DMEM 液 ? 在采样液中需加入抗菌素，可用青霉素（终浓度为 100U/ml ）、 庆大霉素（终浓度为 1mg/ml ）和抗真菌药物（终浓度为 2 μ g/ml ）。 ? 在无菌的带螺旋塑料管分装 2-3ml 采样液。最好储存在 : – 20℃,4℃可放 48 – 96h, 室温 1 – 2 天。 ? 采样拭子：使用头部为聚酯纤维的病毒采样拭子（鼻 及口咽型），铝或塑料做柄，不推荐棉拭子和木柄 ? 1. 监测病例，同时具备以下 4 项条件的病例： （ 1 ）发热 ( 腋下体温≥ 38 ℃ ) ； （ 2 ）具有肺炎的影像学特征； （ 3 ）发病早期白细胞总数降低或正常 , 或淋巴细胞分类计 数减少； （ 4 ）不能从临床或实验室角度诊断为常见病原所致肺炎。 ? 2. 人感染 H7N9 禽流感疑似病例与确诊病例，定义参照《人 感染 H7N9 禽流感诊疗方案（ 2019 年第 1 版）》 采集对象 ? 上呼吸道标本：咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽 漱液和鼻洗液 ? 下呼吸道标本：气管吸取物、肺洗液、肺组织标本 ? 血清标本：发病 7 天内急性期血清和间隔 2-4 周的恢 复期血清 ? 如病人死亡，可采集组织标本：肺组织、气管、支 气管组织等 标本种类 ? 应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本（尤其是 下呼吸道标本） ? 症状出现后尽早采集 ? 尽量在抗病毒药物使用前采集 ? 血清标本应采集发病早期和恢复期双份血清； 标本种类 1. 咽拭子 标本采集 ? 用 2 根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子同时擦拭双侧咽扁 桃体及咽后壁，将拭子头浸入含 3ml 采样液的管中， 尾部弃去，旋紧管盖。 √ × 2. 鼻拭子 标本采集 ? 将 1 根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子轻轻插入鼻道内鼻 腭处，停留片刻后缓慢转动退出。取另一根聚丙烯纤 维头的塑料杆拭子以同样的方法采集另一侧鼻孔。上 述两根拭子浸入同一含 3ml 采样液的管中，尾部弃去， 旋紧管盖。 3. 鼻咽抽取物或气管抽取物 标本采集 ? 用与负压泵相连的收集器从鼻 咽部抽取粘液或从气管抽取呼 吸道分泌物。将收集器头部插 入鼻腔或气管，接通负压，旋 转收集器头部并缓慢退出，收 集抽取的粘液，并用 3ml 采样液 冲洗收集器 1 次（亦可用小孩导 尿管接在 50ml 注射器上来替代 收集器） 5. 血清：采集 5ml 静脉血加入消毒试管中，离心 分离血清，放入带螺旋盖管内， 于 -20 ℃以下保存 。 6. 尸检组织：死亡后尽早解剖，采集肺组织、气 管分泌物标本，置无菌容器中（ 50ml 螺口塑料管） ， 于 -70 ℃以下保存 。 禽 H7 病毒简介 样本采集 标本保存和运输 实验室检测 主要内容 ? 尽快运到实验室 ? 24 小时内可以检测的可以保存在4℃，超过 24 小 时 - 70℃冻存。流感病毒在 - 20℃～ - 40℃时不稳 定，故长期保存应在 - 70℃温度以下，不要冻存 于 - 20℃，会降低流感病毒的检出率 ? 避免反复冻融，冰上一周也比冻融一次要好 ? 血清标本暂时存在可在4℃冰箱，长期保存于 - 20℃冰箱。 标本保存 ? 根据《人