霍乱分析7教学教案.ppt

饮水质量：制备工艺、水质监测结果（出厂水、末梢水）、二次供水水箱消毒效果。 受污染状况：取水点卫生状况、管网破损及其受污染情况。 特殊事件：如供水消毒设备检修、损坏、管网改建等。 采样检测：采集相应的样品进行检测，确定被污染的环节和污染源。 Ⅲ 其他因素调查：调查病例可能存在的其他感染因素，如密切接触传播、日常生活接触传播、媒介生物传播。 五、实验室检测 （一）标本的采集 标本的采集应该与流行病学调查工作紧密结合，包括对病人、疑似病人、密切接触者进行采样。采集的标本可以是粪便、呕吐物、肛拭子和血清等，其中应以粪便为主，同时由于要进行病原分离，因此尽可能在未使用抗生素之前采集。 1、粪便标本的采集 对水样便以吸管吸取1～3毫升，成型便采集成人拇指大小的便量，置于灭菌管内或经增菌后送检。任何容器均应加橡皮塞或将螺旋盖旋紧，容器外壁不可沾染粪便。采集肛拭子标本，以直肠拭子用保菌液或生理盐水润湿后，由肛门插入直肠内3～5厘米处采集，转动取出，插入保存液或无菌试管内送检。粪便标本应在2小时内尽快送检，否则标本应放入Cary-Blair运送培养基中。 沾染粪便的衣物、物品、地面，以及尸体肠内容物等也可作为检材。 所有采集的拭子标本（肛拭子、食品及操作台等的涂抹拭子），当直接用于PCR检测时，不能使用棉拭子和木质拭子棒，因为这类材料中含有核酸扩增抑制剂，而要使用灭菌人造纤维拭子和塑料棒。 2、呕吐物标本 以吸管吸取1～3ml，置可密闭样品管内送检。 3、食品标本 采集50～100g标本置于可密闭灭菌广口瓶或自封塑料袋内，常温下快速送检。 4、水体标本 用灭菌的500ml玻璃瓶采集相对静止的表层水（深度30cm以内）500ml，加盖密封后再用自封塑料袋包裹密封，常温下送检。每个采样点应相距数米；同一采样点采集标本不少于2瓶，用做平行样检测。 同时样品检验单应填写完整，与样品一起送实验室。分离菌株登记内容（采样登记表详见附表2）必须与相对应的患者的临床资料和流行病学资料吻合。 （二）标本的运送 采集的标本宜立即处理和接种培养基进行增菌和/或培养。不能立即检测的标本，需置于保存培养基（碱性蛋白胨水、文-腊氏保存液、Cary-Blair半固体保存培养基等）中保存。所有标本应按照可能有霍乱弧菌对待，注意相应的生物安全要求，置于坚固、防水、密闭、耐压的转运箱中，专人送往实验室。 （三）标本的检测 实验室收到标本应立即进行检测。所有标本首先进行增菌，对食品和环境标本等，应考虑二次增菌的需要；典型病人水样腹泻标本可同时接种选择性培养基。标本最好同时接种强选择培养基（如对霍乱弧菌具强选择性的庆大霉素琼脂、对主要致病性弧菌选择性强的TCBS琼脂、4号琼脂等）和弱选择培养基（碱性琼脂、碱性胆盐琼脂等）。 现场使用的快速检测方法，需要注意其检出灵敏度和应用范围。原则上要求高灵敏度。可以使用检出限与病人标本中菌浓度相符合的简易方法，但应注意对结果的解释和对整个腹泻人群的参考价值。 对于分离到的霍乱弧菌菌株、尤其是分离自首例和前几例病人的菌株，应送上一级疾病控制中心的实验室进行复核。对菌株主要进行以下实验分析： 1、通过标准诊断血清的凝集试验（玻片凝集）进行鉴定和血清分群分型、O1群菌株的生物分型实验； 2、利用必要的生化实验进行鉴定和鉴别； 3、药物敏感性实验； 4、噬菌体生物分型； 5、霍乱毒素和毒素基因的检测（如GM1-ELISA和PCR检测）。 外环境和食品中分离的病原菌，必要时提供给具有菌株染色体脉冲场凝胶电泳分析（PFGE）的实验室，与来自病人的分离株作比较分析，确定相似性，以便从病原学角度获得感染来源证据。流行病学调查的整个过程中，可安排相应的标本采集和检测，开展实验室监测，与流行病学监测资料结合分析以确定感染来源和暴发流行扩散范围。 六、防控措施 采取以切断传播途径为主的综合性防治措施。 （一）隔离治疗病人和带菌者 隔离治疗菌痢病人和带菌者是控制传染源的有效措施。 对病人、疑似病人和带菌者要分别隔离治疗。停服抗菌药物后，连续二次粪便培养未检出霍乱弧菌者解除隔离。 （二）做好疫点、疫区管理工作 1、划定疫点、疫区 （1）疫点：指发生病人、疑似病人或发现带菌者的地方。一般指同门户出入的地方或与病人、疑似病人、带菌者生活上密切有关的若干户为范围。根据传染源的污染情况，一个传染源可有一个以上的疫点。 （2）疫区：为了防止疫点外污染造成续发感染和向外传播，要根据疫点的地理位置、水系分布、交通情况、自然村落等特点来划定疫区。一般在农村以一个村或几个村、一个乡或毗邻乡，在城市以一个或几个居委会或一个街道为范围划为疫区。 2、疫点、疫区的消毒工作 认真做好疫点、疫区内的消毒工作，特别是对病人、疑似病人和带菌者的吐泻物和污染过的环境、物品、饮用水等进