血红蛋白分离提纯.ppt

课题已)血红蛋白的提取和分离 课题背景 蛋白质是生命活动不可缺少的物质。随着人类 基因鋰计划的进展以及多种生物基囚组测序工作的 :完成,人类跨人了后基囚组和蛋白质组时代。对蛋白 质的研究与应用,首先需要得鈍度较高的白质。 :因此,从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的 白质是生物科学研究中经常要做的工作。 分,负黄血液中O2和CO2的运输。在本课题中,我们将 :以血红蛋白为实验材料,学习蛋白质提取和分离的一些基本血红蛋白分子的立体结构 技术 本课题学习目标 、课题的目标: 通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离,理解色 谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理 二、课题重点: 凝胶色谱法的原理和方法 三、课题难点: 样品的预处理、色谱柱填料的处理和色谱柱的装填 基础知识一蛋白质提取和分离原理 蛋白质提取与分离的依据一一蛋白质的物 理化学性质: 形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、 吸附性质、亲和力等千差万别。 提取→凝胶色谱法 分离 方法严电泳法 基础知识 (-)凝胶色谱法(分配色谱法): 1、概念:根据相对分子质量的大小分离蛋白 质的方法。 2、凝胶: 一些微小的多孔球体(内部有许多贯穿的 通道),由多糖类化合物构成,如葡聚糖、 琼脂糖。 3、基本原理 凝胶色谱法的原理 当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时,相 对分子质量小的蛋白质容易穿过多孔凝胶颗粒内部, 路程长,流动慢_;相对分子质量大的分 子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动 快 依据的特性是:蛋白分子量的大小。