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转基因技术在水稻性状改良中的应用进展 世界上有超过 30％的人口以稻米为主食，随着世界人口的增加，对稻米的 需求逐渐增加。据统计，未来 25 年粮食产量必须增加 60 ％才可满足人口增长的 需要。世界尤其是我国将面临粮食问题的严峻挑战。 因此，迫切需要采取措施增 加水稻等农作物的产量。 随着分子生物学研究的不断发展， 转基因技术在植物遗传育种和品种改良上 得到了广泛应用。自 20 世纪人类首次获得可育的转基因水稻以来，转基因技术 在水稻品种改良上得到了广泛应用。该文综述了近年来水稻转基因技术的发展、 应用进程。 l 水稻基因转化方法 基因转化的方法可分为 2 类：一是由载体介导的转化． 主要的方法为农杆菌 介导法；另一类是直接的基因转化，包括基因枪法、电击法、 PEG法、脂质体转 化法和花粉管通道法。近年来，应用较多的为农杆菌介导法和基因枪法。 1．1 农杆菌介导法 农杆菌介导转化法是将外源基因插入农杆菌的质粒上， 由载体将外源基因转 移并整合到植物细胞基因组中去。 农杆菌介导法在水稻上的遗传转化研究最早始 于 1986 年，Baba等用 PEG促进农杆菌原生质球与水稻原生质体融合的方法获得 了水稻愈伤组织，但未获得转基因植株圈。随后。 Raineri 等(1990) 用粳稻的成 熟胚与农杆菌共同培养获得了转基因愈伤组织， Southern 分析表明，T-DNA已整 合入基因组中，但未再生出转基因植株。 Chan等首次报道用农杆菌转化水稻根 系外植体 (1992) 和未成熟幼胚 (1993) 得到可育转基因水稻， Southern blot 分析 表明。T-DNA上的基因可传递给后代。 Hiei 等(1994) 利用“超级一二元载体”首 次实现对粳稻的高频转化， 得到大量转基因植株， 使农杆菌介导转化水稻获得了 突破圈。农杆菌介导法转化方法简单、转化效率高；再生植株可育率高；可转入 较大片段外源 DNA；转入基因的拷贝数少，大大降低了同源抑制产生的基因沉默 机率。 1．2 基因枪法 基因枪转化法是利用火药、 高压气体或高压放电为动力， 将包被有外源基因 的颗粒通过基因枪高速轰击组织或细胞， 使外源基因整合到细胞基因组内。 基因 枪转化的最大 优点是转化材料广泛， 细胞、组织和器官均可用作转化而不受原生质体培养 的限制，从而减小了对基因型的依赖性． 这是它适用于水稻转化的主要原因。 目 前，水稻转化中应用较多的转化材料有幼胚、胚性愈伤组织以及胚性悬浮细胞。 当前，基因枪法已成为水稻遗传转化的可靠途径。 但基因枪法具有价格昂贵、 转 化频率偏低、 导入的外源基因拷贝数高、 在后代中容易丢失、 对片段大的基因难 以导入且嵌合体不易排除等缺点，需要进一步改进。 1．3 其他水稻基因转化方法 PEG转化法是禾谷类作物转化中最早应用的方法之一。 主要原理是利用化合 物聚乙二醇 (PEG)及高 pH值条件诱导原生质体体外摄取外源 DNA。原生质体作为 受体具有群体数大、便于操作、 DNA分子易于进入获得纯合转化子等优点，但原 生质体培养难度大、再生频率低、周期长、不适合水稻转化研究。 电激法也是以原生质体为受体的转化方法旧。 其原理是利用短暂的电场脉冲 作用，使原生质体膜形成可逆的瞬间通道，使