高中生物-基因工程--.pptVIP

§1-1 DNA重组技术的基本工具和基本操作程序;一 基因工程的基本内容;基因工程的概念;基因工程的别名;基因工程培育抗虫棉的简要过程：;基因工程的关键步骤：;解决基因工程关键步骤需要的工具;;基因的剪刀——限制性内切酶（简称限制酶）;识别序列; 大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。;限制酶; 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。;平末端;要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？;;E.coliDNA连接酶;为什么要用运载体？;作为运载体必须具备哪些条件;常用的运载体主要有两类：;质粒：;大肠杆菌的质粒：;原核细胞的基因结构(补充内容）;;;四个基本步骤：;目的基因;1、目的基因的获取;概念：基因文库 （gene library）;基因组文库: 基因文库中包含了一种生物所有的基因,这种基因文库叫做基因组文库. 部分基因文库: 基因文库中包含了一种生物的一部分基因,这种基因文库叫做部分基因文库.;;cDNA文库的构建;基因组DNA文库;如何从基因文库中得到所需要的基因？;④利用PCR技术扩增目的基因;DNA序列自动测序仪： PCR技术：;⑤ 人工合成;3、基因表达载体（重组质粒）的构建;2〉基因表达载体的组成：;步骤二：目的基因与运载体重组;质粒;2、基因表达载体的作用;目的基因与运载体结合;常用的受体细胞：; 1）将细菌用CaCl2处理，以增大细菌细胞壁的通透性。 2）使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。 3）目的基因在受体细胞内，随其繁殖而复制，由于细菌繁殖的速度非常快，在很短的时间内就能获得大量的目的基因。;1、将目的基因导入植物细胞;（2）基因枪法;（3）花粉通道法;2、将目的基因导入动物细胞;3、将目的基因导入微生物细胞;步骤四：目的基因的检测和表达;(四)目的基因的检测与鉴定; 不能，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达。;知识延伸——DNA分子杂交技术;返 回;;复习题;;1）以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定???核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来;2）不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA;3）有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶;4）有关基因工程的叙述正确的是 （ ） A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料;5）基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （ ） A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达