实验七流式细胞仪检测关键技术.docVIP

试验七流式细胞仪检测技术 免疫细胞是一组不均一细胞群体。多种特定细胞群其细胞表面表示有各自特异表面标志分子，利用这些特异表面标志，能够判定、分离和纯化对应细胞群。伴随单克隆抗体技术诞生和免疫标识技术（尤其是荧光标识技术）发展，和计算机科学应用，使利用仪器方法检测特异细胞膜表面分子成为可能。本章介绍荧光激活细胞分类技术就是采取单克隆抗体技术和免疫荧光标识技术，并结合光学检测和计算机分析技术而产生判定和分离特定细胞亚群技术。 试验原理 流式细胞仪（flowcytometer）是一个能够探测和计数以单细胞液体流形式穿过激光束细胞检测装置，因为在检测中使用细胞标志示踪物质为荧光标识物，所以，用来分离、判定细胞流式细胞仪有被称为荧光激活细胞分类仪（fluorescenceactivatedcellsorter,FACS）,是分离和判定细胞群及亚群一个强而有力应用工具。其原理是在一组混合细胞群中，加入特异针对特定靶细胞表面分子荧光标识单克隆抗体，这种特异单克隆抗体和其对应抗原靶分子结合，结合后荧光标识抗体停留在特定细胞表面，称为荧光抗体标识靶细胞；将含有被标识细胞混合细胞群混悬在一定容积上样缓冲液中，再经过FACS进样吸管孔，仪器就会将细胞悬液制成以单细胞排列微细流束。当每一个细胞经过仪器激光束照射时，带在细胞上荧光就会被对应激光束激活并发出对应荧光，经过敏感光电倍增管即可检测到从细胞表面发