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防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定(液相色谱法)技能点:试样溶液的测定主讲:李冰心 食品营养与检测专业教学资源库 一 目 录试样制备二试样提取五四三仪器参考条件试样溶液的测定标准曲线的制作 — — 试样制备一试样提取二1.仪器准备2.一般性试样3.含胶基的果冻、糖果等试样4.油脂、巧克力、奶油、油炸食品等高油脂试样1.仪器准备防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定仪 器规 格仪 器规 格高效液相色谱仪超声波清洗机电子天平0.001g低速速离心机8000r/min恒温水浴锅100℃±1℃涡旋振荡器水性微孔滤膜0.22μm具塞离心管50mL容量瓶50mL刻度移液管1mL、2mL水相转移至50mL容量瓶水相转移至50mL容量瓶水相转移至50mL容量瓶待液相色谱测定待液相色谱测定待液相色谱测定定容至50mL定容至50mL定容至50mL2.一般性试样防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定水相转移至50mL容量瓶适量上清液过0.22μm滤膜50mL容量瓶涡旋混匀涡旋混匀涡旋混匀50℃水浴超声20min冷却至室温50℃水浴超声20min冷却至室温50℃水浴超声20min冷却至室温加水25mL加水25mL加水25mL准确称取2g(0.001g)准确称取2g(0.001g)准确称取2g(0.001g)8000r/min离心5min8000r/min离心5min加亚铁氰化钾溶液2mL加亚铁氰化钾溶液2mL加亚铁氰化钾溶液2mL50mL具塞离心管50mL具塞离心管50mL具塞离心管残渣中加水20mL残渣中加水20mL残渣中加水20mL8000r/min离心5min8000r/min离心5min8000r/min离心5min超声5min超声5min超声5min涡旋混匀涡旋混匀涡旋混匀水相转移至50mL容量瓶待液相色谱测定定容至50mL3.含胶基的果冻、糖果等试样防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定水相转移至50mL容量瓶适量上清液过0.22μm滤膜50mL容量瓶涡旋混匀50℃超声20min冷却至室温70℃水浴加热溶解试样加水25mL准确称取2g(0.001g)8000r/min离心5min加亚铁氰化钾溶液2mL50mL具塞离心管残渣中加水20mL8000r/min离心5min超声5min涡旋混匀水相转移至50mL容量瓶待液相色谱测定定容至50mL4.油脂、巧克力、奶油、油炸食品等高油脂试样防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定正己烷10mL加氨水溶液25mL、乙醇1mL水相转移至50mL容量瓶适量上清液过0.22μm滤膜50mL容量瓶50℃超声20min冷却至室温涡旋混匀60℃水浴加热约5min,不时振摇溶解脂肪准确称取2g(0.001g)8000r/min离心5min加亚铁氰化钾溶液2mL、乙酸锌溶液2mL50mL具塞离心管残渣中加水20mL8000r/min离心5min超声5min涡旋混匀弃去有机相仪器参考条件三色谱柱:C18柱,4.6mm×250mm,5 μm,或等效色谱柱。流动相:甲醇+乙酸铵溶液 = 5+95。流速:1mL/min。检测波长:230nm。进样量:10 μL。标准曲线的制作四将山梨酸、苯甲酸标准系列工作溶液注入液相色谱仪中,测定相应的峰面积,以山梨酸、苯甲酸标准系列工作溶液的质量浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。试样溶液的测定五将试样溶液注入液相色谱仪中,得到峰面积,根据标准曲线得到待测液中山梨酸、苯甲酸的质量浓度。结果计算防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定式中:X——试样中山梨酸、苯甲酸含量,g/kg;ρ——由标准曲线得出的试样中山梨酸、苯甲酸的质量浓度,mg/L;V——试样定容体积,mL;m——试样质量,g;1000——由mg/kg转换为g/kg的换算因子。结果保留3位有效数字。 谢谢 谢谢
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