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PAGE PAGE 9 专题评估检测(一) (时间：60分钟　满分：100分) 1．(14分)通过DNA重组技术使原有基因得以改造的动物称为转基因动物。运用这一技术使羊奶中含有人体蛋白质。下图表示了这一技术的基本过程，在该工程中所用的基因“手术刀”能识别的序列和切点是—G↓GATCC—，请回答下列问题。 (1)从羊染色体中“切下”羊蛋白质基因的酶是________，人体蛋白质基因“插入”后连接在羊体细胞染色体中时需要的酶是__________________。 (2)请写出质粒被切割形成黏性末端的过程。 ______________________________________________________。 (3)人体蛋白质基因之所以能“插入”到羊的染色体内，原因是__________________________________，“插入”时用的工具是________，其种类有________________________________________ _____________________________________________________。 2．(14分)大豆花叶病毒(RNA病毒)是世界性大豆病害，是造成大豆减产的重要原因。某科研小组制备了大豆花叶病毒的空衣壳蛋白(CP蛋白)，生产过程大致如下，请回答问题： (1)图中的①是指______________________________________。 (2)过程Ⅱ中应用的酶是________。此过程中，先要在大豆花叶病毒的基因文库中查找______________________的核苷酸序列，以便合成特异性引物。 (3)在上述生产流程中，________(填序号)是基因工程生产CP蛋白的核心步骤。为检测样液中是否含有有效成分，在Ⅶ可使用________进行检测。 3．(14分)下图是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图。据图回答： (1)获得基因A有两条途径：首先以A的mRNA为模板，在__________酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在__________的作用下合成双链DNA，从而获得所需基因；其次根据目标蛋白质的________序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的________序列；再通过化学方法合成所需基因。 (2)利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有________、________、4种脱氧核糖核苷三磷酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成。 (3)由A和载体B拼接形成的C通常称为_________________。 (4)在基因工程中，常用Ca2＋处理D，其目的是_______________ _____________________________________________________。 4．(14分)CTB是霍乱弧菌产生的肠毒素(蛋白质)结构的一部分，可用作针对霍乱弧菌的疫苗。研究人员提取了控制CTB合成的基因(ctb)，构建基因表达载体(如图所示)，将其导入番茄，然后用转基因番茄饲喂试验小鼠，检测疫苗的有效性。请回答相关问题： (1)为了在短时间内获得大量基因，可以采用________技术，与细胞内DNA复制时的解旋过程相比，该技术的DNA解链过程有何不同？________________(写出一点即可) (2)使用两种限制酶切割载体可防止切开的载体的两个末端重新连接起来，原因是_________________________________________ ______________________________________________________。 (3)可采用________法将基因表达载体导入番茄细胞，然后在加入了________的培养基中进行初步筛选，之后还需用________方法检测ctb基因是否整合到番茄染色体的DNA上。 (4)提取转基因番茄不同部位的蛋白质进行检测，发现只有果实中含有CTB。ctb基因只能在果实细胞中表达，这与基因表达载体中的________________有关。 (5)用转基因番茄果实饲喂试验小鼠，若能在小鼠的血清中检测到________，则说明该转基因疫苗是有效的。 5．(14分)真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。回答下列问题。 (1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A，以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A，其原因是__________________________ ______________