HPLC操作规程和注意事项[借鉴].pdfVIP

HPLC 操作规程 1.所需的流动相，应该用合适的0.45μm 滤膜过滤。 2.样品溶液和标准溶液 ，也应该用合适的0.45μm 滤膜过滤，滤膜也分为水相 和有机相。 3.开机顺序：开泵，开检测器，进入色谱工作站。 4.泵的启动：用流动相冲洗滤器，再把滤器浸入流动相中，启动泵。打开泵的 排放阀，用专用注射器从阀口抽出流动相约 20ml，设置高流速（9ml/min)或用 冲洗键 PURGE 进行排气，观查出口处流动相呈连续液流后，将流速逐步回零或 停止（STOP）冲洗，关闭排放阀。 5 .将流速调节至分析用流速，对色谱柱进行平衡，同时观察压力指示应稳定， 用干燥滤纸片的边缘检查柱管各连接处应无渗漏，初始平衡时间，一般约需 30 分钟。平衡的标志是泵压不波动和基线平直，说明已经平稳。 6. 检测器的开启：开启电源，选择光源（氘或钨）灯，选定检测波长，待预热 15 分钟方可用于分析测试。 7.压力表无压力显示或压力波动时不能进行分析，应检查泵中气泡是否已排除， 各连结处有无漏液，排除故障后方能进行操作。如压力升高，甚至自动停泵， 应检查柱端有无污染堵塞，如有堵塞，应该用相应的溶剂清洗。如果清洗不了， 可小心卸下开柱的进口螺帽，挖出被污染填冲剂后，补入同类填充剂，仔细安 装好，再进行操作。 8