发酵罐操作说明书.pdf

发酵系统操作规程 一、 发酵前准备工作 （1） 检查电源是否正常，空压机、蒸汽发生器和循环水系统是否正常工作 （2） 检查系统上的阀门、接头及紧固螺钉是否拧紧 （3） 开动空压机，用0.15Mpa 压力，检查发酵罐、过滤器、管路、阀门等 密封性是否良好，有无泄漏。罐体夹套与罐内是否密封（换季时应重 点检测），确保所有阀门处于关闭状态 （4） 检查冷却水压、电压、气（汽）压能否正常供应。进水压维持在 0.12Mpa，允许在 0.15-0.2Mpa 范围变动，不能超过 0.2Mpa，温度应 低于发酵温度 10℃以上；电源AC220V±10%，零地分开，频率 50Hz， 罐体可靠接地；输入蒸汽压力应维持在 0.4Mpa，进入系统后通过阀门 控制压力为 0.12-0.13MPa；空压机压力值 0.7Mpa，空气进入压力应 控制在 0.25-0.30MP （空气初级过滤器的压力值） （5） 检查电机能否正常运转。电磁阀能否正常吸合 二、 灭菌 1. 发酵系统安装好后的初次清洗 罐内的清洗：种子罐可将罐体上方的法兰卸开，由操作工采用洁净布手 动清洗，结束后排尽罐内的污水，在多冲洗几遍即可。发酵罐的清洗可采用 自来水管通过手孔向罐体内壁冲洗，当水位上升到搅拌轴的第二片叶轮时停 止冲洗，开动电机搅拌清洗。各管路的清洗，可以先采用清水冲洗，再根据 相应功能采用相应的清洗介质（清洗管路时应以保护管路中的各种元件为前 提），具体步骤可参考“空气管路的灭菌”。如果发酵系统长时间不用或培养 的菌体与上一批次的不相同时，可采用 2%NaOH 清洗，清洗结束后应对发酵系 统灭菌 2. 发酵罐空消 （1） 空气精过滤器的空消：将所有阀门均关闭，然后微开J3、J4、J5、打 开 Q9，通过调节J3、J4、J5 阀门的开启度保持空气精过滤器上端压 力表读数为 0.12-0.125Mpa，维持 30 分钟，空气经过滤器消毒完成 （2） 发酵罐空消：打开G2、J2、G3、J1、J9、Q6、Q7 及 Q9，通过调节G2 和 J1 阀门的开启度调节发酵罐压力控制在0.12-0.125Mpa，温度 121 度-125 度。维持 30 分钟，发酵罐空消结束 （3） 当空消时间达到30 分钟后，关闭 J2、J3、J5，然后迅速打开Q2、Q3， 通空气吹扫空气精过滤器，待 J4 阀门出口空气干燥后关闭J2、J3、 J4、J5，保持空气精过滤器压力表读数为 0.1Mpa 3. 发酵罐实消 实消是当罐内加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭菌的过程 (1)空消结束后，将校正好的 PH 电极装好，尽快将配好的培养基从加料口加入罐 发酵罐操作说明书 内 (2)培养基在进罐之前，应先糊化，一般培养基的配方量应根据工艺要求确定， 发酵液的最终容积为罐体全容积的 70％左右计算(泡沫多的培养基为 60％左右， 泡沫少的培养基可达 75～80％)，考虑到冷凝水和接种量因素，以及是否流加， 初定容由生产根据工艺的要求自行决定，需在实践中摸索 (3)开启机械搅拌装置，低速转动，使罐内物料均匀混合 (4)打开夹套排污阀 Q8、蒸汽阀 J7，对罐内培养基预热（采用夹套通汽预加热） 当罐内温度升到 90℃时（具体温度应按蒸汽质量而变动），关闭夹套进汽阀 J7， 关闭 Q8，全打开进汽阀G2、J9,微开 Q6、Q7，关闭Q4、Q5，向罐内通蒸汽，微 开尾气阀门 J1，关闭电机搅拌 (5)通过调节 G2 和 J1 的开启度，当温度升到 121—123℃，罐压升至 0.12MPa 时， 控制蒸汽阀门 G2、J1、J9 的开度，维持温度与罐压，并开始计时，当时间到达 30 分钟之前，关闭 G3 （关闭前应人为地开大蒸汽量几次，避免培养基残留于阀门 处）,关闭 QJ9，关闭Q6、Q7，关闭Q9、G2 停止供汽。关闭夹套排污阀门 Q8， 打开冷却水阀 Q4、Q5 向夹套通水冷却，打开电机搅拌，当压力降到0.05MPa 时 打开空气阀