TU-1901紫外可见分光光度培训资料.ppt

TU-1901紫外可见分光光度计;一、紫外可见分光光度法;2、紫外可见分光光度法分类; 紫外可见分光光度法特点; 按波长范围划分： 可见分光光度计（400-780nm） 紫外可见分光光度计(200-1000nm);光的吸收程度与光程长的关系？; 比尔定律;2、朗伯—比耳定律 朗伯—比耳定律是光吸收的基本定律，是分光光度法定量分析的依据。 当入射光波长一定时，溶液的吸光度A是吸物质的浓度C及吸收介质厚度ι（吸收光程）的函数。其常用表达式为，式中ε为系数： A = ε· ι·C;二、紫外可见分光光度计;分光光度计的主要部件和工作原理： ;TU-1901单波长双光束分光光度计;（一）光源 紫外可见分光光度计理想的光源应具有整个紫外可见光域的连续辐射，强度应高，且随波长变化能量变化不大。在可见光区，常用钨丝灯（卤钨灯）为光源，波长范围为320～2500nm。在紫外光区，常用氢灯、氘灯为光源，波长范围为200～375nm。 TU-1901紫外可见分光光度计光源：卤钨灯与氘灯。 以下图片是该仪器的光源室及光源灯： ;TU-1901光源室图片;TU-1901光源灯图片;（二）单色器 单色器是将光源发射的复合光分解为单色光的光学装置。 单色器一般由五部分组成：入光狭缝，准光器，色散器，投影器，出光狭缝。 色散器是单色器的核心部分，常用的色散元件是棱镜和光栅。TU-1901采用全息光栅，进一步降低仪器的杂散光，使仪器分析更加准确。 单色器的狭缝设计一定的宽度，经过狭缝的单色光是一个具有一定光谱宽度的谱带，称为光谱带宽。从理论上讲，狭缝的宽度愈小，波长愈接近单色光，但带宽太小，将使单色光的强度减小，使光电流信号减弱，降低信噪比。 ; 由于分子吸收光谱的吸收峰比较宽和平滑，一般情况下光谱带宽2～6nm对分析结果影响不大。TU-1901配置为固定狭缝，光谱带宽为2nm。 ;（三）吸收池 吸收池是盛放样品溶液的容器，它具有两个相互平行、透光且具有精确厚度的平面。;（四）检测器 检测器是利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号。;三、分光光度计的检验和维护;紫外可见分光光度计主??检验的几项技术指标;吸收池的配套方法;（二）TU-1901分光光度计测量条件的选择 1、测量波长的选择 通常都是选择最强吸收带的最大吸收波长λmax作为测量波长，称为最大吸收原则，以获得最高的分析灵敏度。 2、适宜吸光度范围的选择 任何光度计都有一定的测量误差，这是由于测量过程中光源的不稳定、读数的不准确或实验条件的偶然变动造成的。; 一般来说，当透射比为15%～65%（吸光度0.2～0.8)时,浓度测量的相对误差较小,当A=0.434时,浓度的相对误差最小。在实际工作中，可通过调节待测溶液的浓度或选用适当厚度的吸收池的方法，使测得的吸光度落在所要求的范围内。 3、仪器狭缝宽度的选择 狭缝的宽度会直接影响到测定的灵敏度和校准曲线的线性范围。 狭缝宽度过大时，入射光的单色光降低，校准曲线偏离比耳定律，灵敏度降低；狭缝宽度过窄时，光强变弱，势必要提高仪器的增益，随之而来的是仪器噪声增大，于测量不利。 ; 选择狭缝宽度的方法是：测量吸光度随狭缝宽度的变化。狭缝的宽度在一个范围内，吸光度是不变的，当狭缝宽度大到某一程度时，吸光度开始减小。因此，在不减小吸光度时的最大狭缝宽度，即是所欲选取的合适的狭缝宽度。;（三）分光光度计的保养和维护; （4）电扇不宜直接向仪器吹风，以防止光源灯因发光不稳定而影响仪器的正常使用。 （5）尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。 （6）供给仪器的电压AC220V±10%，频率50HZ±1HZ单向交流电，最好配置交流稳压器，功率不小于500VA,室内应有地线并保证仪器良好接地。 （7）避免在有硫化氢等腐蚀性气体的场所使用。;2、仪器保养和维护方法 （1）光源 光源的寿命是有限的，为了延长光源使用寿命，在不使用仪器时不要开光源灯，应尽量减少开关次数。在短时间的工作间隔内可以不关灯。刚关闭的光源灯不能立即重新开启。 仪器连续使用时间不应超过3h。若需长时间使用，最好间歇30min。 如果光源灯亮度明显减弱或不稳定，应及时更换新灯。更换后要调节好灯丝位置，不要用手直接接触窗口或灯泡，避免油污沾附。若不小心接触过，要用无水乙醇擦试。;TU-1901分光光度计对光源的使用要求：; 4、该