技能竞赛 第二届微课大赛作品PPT 第二届全国职业院校轻化工类教师微课大赛87号作品微课PPT-液相色谱开机前准备-流动相的配制.pptx

; 实验小助在做液相色谱预实验中，发现仪器基线呈锯齿状，请你帮他诊断一下问题所在。;流动相的三巨头：;壹;流动相的选择;1.高纯度，采用色谱纯溶剂 2.pH范围与色谱柱匹配，避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂 3.对试样有适宜的溶解度 4.溶剂粘度要小 5.与检测器相匹配;;;A.分析纯 B.优级纯 C.色谱纯√ ;;A.确定最佳分离状态时的流动相pH B.选择具有与流动相的pH相近的pKa的缓冲液 C.确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收 ;流动相的过滤;贰、过滤;2.滤膜选择： 聚四氟乙烯滤膜：适用于所有溶剂，酸和盐。 醋酸纤维滤膜：特别适用于水基溶剂。 尼龙66滤膜：适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，可以用于强酸，不适用于DMF，THF， CHCl3 等溶剂。 再生纤维素滤膜：蛋白吸收低，同样适用于水溶性样品和有机溶剂。; 3.所需设备：;贰、过滤 4.过滤操作;流动相的脱气;脱气：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡 气泡对测定的影响： 1）泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积 2）柱中气泡使流动相绕流，峰变形 3）检测器中的气泡产生基线波动 ;常用脱气方法; 脱气机-在线真空脱气;A.缓冲液使用前必须过滤 B.缓冲液使用后一定要进行清洗，以免造成腐蚀、磨损、阻塞：用纯水冲洗30-60 min(1 ml/min)，再用甲醇冲洗30 min。 C.水和缓冲液易受到细菌和霉菌的影响，需当天使用 ;谢谢聆听！