sTLR4的研究进展「范本」.doc

制度大全 sTLR4的研究进展「范本」 sTLR4的研究进展本文简介：摘要：TLR4是第一个被发现的哺乳动物的Toll样受体（TLRs）,广泛表达于哺乳动物细胞表面，能识别病原体的入侵，通过识别配体，激活核转录因子kappaB（NF-B）,进而触发炎症反应。近年来，在体液中发现了一种可溶性形式TLR4（sTLR4）.sTLR4来自TLR4mRNA的可变剪 sTLR4的研究进展本文内容： 摘要：TLR4是第一个被发现的哺乳动物的Toll样受体（TLRs）,广泛表达于哺乳动物细胞表面，能识别病原体的入侵，通过识别配体，激活核转录因子kappaB（NF-B）,进而触发炎症反应。近年来，在体液中发现了一种可溶性形式TLR4（sTLR4）.sTLR4来自TLR4mRNA的可变剪切，广泛存在于各种体液中。sTLR4主要通过与MD-2形成复合体，抑制LPS信号通路，从而抑制LPS引起的炎症反应。sTLR4作为炎症的诊断工具；作为某些炎症的拮抗剂，抑制炎症反应；替代细胞膜上TLR4受体的胞外域，用于研究信号分子与TLR4的相互作用；作为某些癌症的预后指标。 关键词：sTLR4;可变剪切；炎症反应；癌症； 1sTLR4的概述 1.1sTLR4的来源 TLR4受体属于Ⅰ型跨膜糖蛋白，结构上主要由胞外域、跨膜域和胞内域构成。其胞外域由富含亮氨酸的重复序列组成，能结合相关配体。跨膜域是介导信号转导的主要结构。胞内域进化保守，因其结构类似于IL-1受体，故称为TIR（Toll/IL-1receptor）区。TLR4的固有配体主要有细菌脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）、热休克蛋白（Heatshockprotein,HSP）60、软脂酸等[1]. 一个基因的不同外显子和内含子可以组合并一起被剪切下来，从而产生出不同的mRNA.一个外显子或内含子是否被剪切保留在成熟的mRNA中也是可以变化的，故称之为可变剪切。Pre-mRNA可变剪切过程在真核生物中极为普遍，尤其是脊椎动物。TLR4的mRNA前体在成熟过程中会进行选择性剪切，产生TLR4mRNA亚型。Iwami等[2]在研究中发现，用DNA印迹技术可检测到多种TLR4mRNA亚型。其中一种亚型与成熟TLR4mRNA大致相同，区别在于第二和第三个外显子之间有额外的144bp的插入序列，此144bp插入序列可在TLR4mRNA的基因组文库中发现，且符合碱基互补配对规则，是TLR4mRNA选择性剪切产物。此段插入序列在110bp处有一个框内终止密码子，可编码一种稳定存在的可溶性的蛋白质，即sTLR4.杜金苓等[3]发现绵羊TLR4基因存在3种剪接体形式，除正常TLR4外将两种新型剪接体分别命名为Var2-TLR4和Var3-TLR4.Var2-TLR4在第2外显子与第3外显子之间有222bp碱基的插入，但在插入序列中提前出现终止密码子，导致Var2-TLR4可能出现一个由86个氨基酸构成的蛋白，这种情况与鼠sTLR4非常相似。 1.2sTLR4的作用机制 研究中发现，额外的144bp插入序列编码122aa的蛋白质，开始的86aa与TLR4胞外域相同，只有87~122aa不同[2].由于sTLR4与TLR4胞外域结构上极为相似，Hyakushima等[4]人工制备一种可溶形式的缺少胞质域和跨膜域的TLR4,包含推测的胞外域（Met1-Lys631）.结合试验证明了sTLR4能与髓样分化蛋白2（Myeloiddifferentiationprotein-2,MD-2）结合，而且sTLR4/MD-2复合体能结合LPS,单独的sTLR4则不能结合LPS,且sTLR4/LPS复合体能抑制LPS诱导的TLR4/NF-B信号通路激活[4-6].因此，sTLR4能与MD-2形成复合体，与细胞膜上的TLR4信号复合体竞争性结合LPS等配体，阻断TLR4信号通路，从而抑制LPS等配体引起的炎症反应。 1.3sTLR4的分布 编码sTLR4的TLR4mRNA亚型广泛存在于多种组织中，包括脑、心、肾、胸腺、脾、小肠和睾丸。sTLR4也在多种体液中存在，包括唾液、血清、关节液、脑脊液、羊水和胸腹水。Zunt等[7]在健康人的静息唾液中发现了sTLR4,并且有4种不同大小的sTLR4,分子质量分别为90、78、54和44kD,但只有90kD的sTLR4有生理活性。在健康人的血清中也可检测到sTLR4,但是浓度极低。有文献报道，在LPS直接刺激后，血液中会释放大量的细胞因子、趋化因子以及sTLR4[8].用酶联免疫吸附试验（Enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA）可检测到关节液中的sTLR4,并且不同部位关节液中sTLR4含量不同，掌腕关节关节液中sTLR4含量高于膝盖关节液[9].健