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- 2020-10-27 发布于山东
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聚合酶链式反应（ PCR）
原理：
DNA 的半保留复制时，双链 DNA 在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在 DNA 聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配
对原则复制成同样的两分子挎贝。在实验条件下， DNA 在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。
因此，通过温度变化控制 DNA 的变性和复性，并设计引物做启动子，加入 DNA 聚合酶、 dNTP 就可以完成特定基因的体外复制。 PCR类似于 DNA 的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。
PCR由变性 - 退火 ( 复性） - 延伸三个基本反应步骤构成：
①模板 DNA 的变性：模板 DNA 经加热至 94℃左右一定时间后，使模板 DNA 双链或经 PCR 扩增形成的双链 DNA 解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
②模板 DNA 与引物的退火 (复性 ) ：模板 DNA 经加热变性成单链后，温度降至 40~60 ℃左右，引物与模板 DNA 单链的互补序列配对结合；
③引物的延伸： DNA 模板 - 引物结合物在 DNA 聚合酶的作用下，于 72℃左右，以 dNTP 为反应原料，靶序列为模板，按碱
基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板 DNA 链互补的半保留复制链，重复循环就可获得更多的“半保留复制链”，
而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一
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