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病理检验技术
常规组织病理技术
组织石蜡切片
贴片、烤片
贴片、烤片
一、贴片
概念:将在摊片机恒温水中展平的组织蜡片贴在载玻片或盖玻片上称为贴片。
贴片、烤片
一、贴片
贴片操作:
1.用铅笔在载玻片的磨砂边写上蜡块上的号码,无磨砂的载玻片需用玻璃笔刻写号码。
2.将玻片倾斜放入摊片机恒温水中慢慢靠近蜡片的一端,然后用玻片慢慢捞起蜡片,使蜡片贴在玻片上,必要时用镊子将蜡片固定在水中,便于将蜡片贴在玻片合适的位置。
贴片、烤片
一、贴片
贴片操作:
3.将贴好片的玻片倾斜拿着,并将玻片的一角(带有玻片流下的水滴)接触水面一下,以带走水分,否则组织蜡片会浮在水面上发生移位。玻片上的水分少,也可以缩短烤片时间。
4.将贴好片的玻片按顺序插在玻片抽上烤片。
贴片、烤片
一、贴片
贴片的注意事项:
1.贴片时要把组织蜡片贴在载玻片适当的位置或贴在盖玻片中央,按组织蜡块切片的顺序排列在玻片抽上,尤其是用盖玻片贴片,无法标记号码,更要严格按顺序排列,绝不能调乱错排,否则会张冠李戴引起严重后果。
2.用载玻片贴片时要注意“定点”和“定向”。“定点”是贴片时,应把蜡片贴在载玻片除粘贴标签外剩余位置的中央。用盖玻片贴片时蜡片贴在盖玻片的中央。而“定向”是对皮肤组织、胃肠道或囊壁等层次清楚的组织,其长轴应与载玻片的长轴平行,并使表皮层或黏膜面在玻片的下部。
贴片、烤片
一、贴片
贴片的注意事项:
3.如一个病理号有两个或以上蜡块,每张载玻片可贴两个蜡块的蜡片。
4.细小组织如穿刺、内镜等小标本,应多贴几张蜡片,以利于医师观察诊断。
贴片、烤片
一、贴片
贴片的注意事项:
5.用于贴片的玻片要干净,最好经过酸洗,否则在染色过程中容易出现脱片现象。一些组织如血块、脑组织等和需要切厚片的组织如脂肪等,以及由于浸蜡时温度过高而变脆的组织、长期固定于甲醛液内的组织和大切片等组织切片在染色时容易脱片,因此,在贴片前需要先将玻片涂上蛋白甘油;方法是取小玻璃棒沾上一小点蛋白甘油于干净玻片上,以洁净之手指在玻片上均匀、薄层涂抹,涂完即可用于贴片。用于免疫组织化学染色的切片,贴片时载玻片需要进行硅化等处理(详见免疫组织化学染色章节)。玻片上的硅化物容易着染伊红,所以HE染色贴片不宜用硅化玻片。
贴片、烤片
二、烤片
概念:组织蜡片贴在玻片后,放入一定温度的烤箱内或烤片机上烘烤,将组织蜡片上的水分烤干和石蜡熔化,使组织蜡片牢固贴附在载玻片或盖玻片上,称为烤片 。
贴片、烤片
二、烤片
烤片操作:烤片是防止切片在染色过程中脱片的关键。其操作如下:
1.贴片后切片放满一抽,马上放入60~65℃烤箱中烤片20~30分钟,使蜡片水分蒸发和石蜡熔化,组织切片牢固贴在玻片上,取出即可进行染色。
2.如果用烤片机烤片,则每贴一张片即放在烤片机上烘烤,烤约20~30分钟后插入玻片抽即可进行染色。
贴片、烤片
二、烤片
烤片的注意事项:
1.烤片时间不够,在染色过程中容易脱片;烤片时间过长和温度过高,组织切片过于干燥,还没染色就会出现脱片现象。
2.如不需立即染色,组织蜡片贴在玻片后可在45℃恒温箱内烤片数小时以上,直至将蜡片水分烤干。由于烤片温度不高,蜡片石蜡不会熔化,蜡片可长时间保存,放37℃恒温箱内或4℃冰箱内可保存1年以上,如放室温保存,要注意防潮防霉。
贴片、烤片
二、烤片
烤片的注意事项:
3.用电热烤片机烤片,一般要用载玻片贴片,每贴一张片即放到烤片机烤片,烤片数量够满一抽即可插入玻片抽染色,这样边贴片边烤片,节省时间。
4.玻片应稍微倾斜放在烤片机上,让组织蜡片的水流下,否则蜡片浮在水滴上,水滴烘干后,蜡片贴在玻片上会有皱折。
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