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UV-2600型紫外分光光度计操作指导书
1概况
1.1仪器概况:
UV-2600型紫外分光光度计是由日本岛津( Shimadzu )生产制造,与功能强大的操作软
件UVProbe结合,操作简单方便,且符合 SH/T0181方法的测量精度要求。
1.2主要技术参数
波长范围
185nm?900nm
(使用积分球附件ISR-
2600Plus 时 220nm?1400nm)
分辨率
0.1 nm
波长准确性
± 0.3nm
0.1、0.2、0.5、1、2、5nm
谱带范围
测光方式
双光束方式
杂散光
0.005%以下
检测器
光电倍增管R-928
测光范围
-5 ?5Abs
比色池
1cm
光源
50W卤素灯、氘灯
单色器
切尼尔-特纳单色器
主电压
AC100V?240V
主频率
50/60Hz
1.3使用条件
操作温度:15?35 C
操作湿度:30%?805%
2仪器结构
仪器由UV-2600型紫外分光光度计和计算机组成。
3操作步骤
3.1开机
在使用前先确认仪器和计算机的工作电源, 检查仪器样品室应无遮挡光路的物品。 确认 后先开启计算机,然后开启仪器电源。 待分光光度计外侧的指示灯显示绿色时, 启动电脑桌 面上的UVPROBE程序。
首先从下拉式菜单的仪器项上追加需要的仪器, 操作完毕如下图①所示, 然后点击上图
的连接键②,这样仪器与计算机连接 (当然,中间的通讯电缆的连接、 通讯口的指定等都是
必须的,此处不再赘述)并开始下示的初始化面。(11)(12)(13)(14)
必须的,此处不再赘述)并开始下示的初始化面。
(11)
(12)
(13)
(14)
初始化大约需要5分钟左右,进行一系列的检查和初置, 如一切顺利通过就可以开始测
3.2测定
首先选择测定的方式,在主菜单上能发现右图所示的各键,自左至右
首先选择测定的方式,在主菜单上能发现右图
所示的各键,
自左至右
分别为:
①报告生成器:用于制作各种格式的报告。
②动力学测定方式:
一般测定吸收值随时间的变化,通常用于酶反应随时间的变化。
③光度测定(定量)方式:可进行多波长、单波长、峰高或峰面积定量。校准曲线可使用多点、单点、K因子等方法。由于具有自定义方程的功能, DNA/蛋白质测定等以前需
要特殊选购的软件才能进行的工作,使用 UVPROBE可自编程序进行测定。
④光谱测定方式:可进行紫外可见区的光谱测定。
3.3光谱测定方式 3.3.1参数的设定
点击菜单栏上的:叫i I键,即可出现如下图所示的选择测定条件的画面:
在此对话框中可选择波长测定的范围、扫描的速度、采样间隔等条件。
在此对话框中可选择波长测定的范围、扫描的速度、采样间隔等条件。
点击图中[试样准备]标签,可输入重量、体积、稀释因子、光程长等信息。
点击图中[仪器参数]标签,可选择测定种类(吸收值、透射率、能量、反射率)以及
通带(狭逢)等条件。点击主菜单上的键,可分别开关图象面板(图中的左键)、数据处理面板(中)以及方法面板(右键)。
通带(狭逢)等条件。
点击主菜单上的
键,可分别开关图象面板(图中的左键)
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(中)以及方法面板(右键)。 数据处理面板
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500nm,再点击①自动调零。
500nm,再点击①自动调零。
首先点击上图的②进行基线校正,然后点击③波长设置到
为何要如此做?原因非常简单,由于一般的分光光度计的能量在 500nm左右最强,在此自
此后,设置样品点动调零可得到最正确的基线。通常上述操作在开机后进行一次就足够了。
此后,设置样品点
击④键即可开始测定。
3.4光度测定方式
341参数的设定此处显示的波长类型是“点”表示测定高度,如果选择的是范围,则需输入起始和结 束波长,并可选择最大、最小、峰、谷或面积等作为定量的依据。测定的方式
341参数的设定
此处显示的波长类型是“点”表示测定高度,如果选择的是范围,则需输入起始和结 束波长,并可选择最大、最小、峰、谷或面积等作为定量的依据。
测定的方式
选择测定波长的
选择和登录波长
无论如何选择,波长都是必须的,并要加入以后才有效。
在某单栏上有右列各…. . 键,点击以后分别出现标准表(最左) 、样
品表(左2)、
标准表工作曲线图(右2)和样品图(最右)。工作曲线样品图
标准表
工作曲线图(右2)和样品图(最右)。
工作曲线
样品图
样品表
3.4.2 定量测定
首先如前所述,选择了点及波长,然后在方法中选择校准, 在此决定用工作曲线法定量,
并选择多点、单点或 K因子法等。
进行定量测定也需要基线校正和自动调零,方法如前面所述。
此后,样品室内逐个放入标准, 点击上图下方的读数键即可。 注意,无论是测定标准
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