实验5血液葡萄糖的测定.ppt

实验五 血液葡萄糖的测定;光度测定法的原理及应用;精品资料; 你怎么称呼老师？ 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你是否会认为老师的教学方法需要改进？ 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ 教师的教鞭 “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我笨，没有学问无颜见爹娘 ……” “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”;光度法的原理;兰伯特—比尔定律数学表达式;2.摩尔吸光系数ε的讨论;光度法的计算;;1）预热仪器：为使测定稳定，将电源开关打开，使仪器预热20min，为了防??光电管疲劳，不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开，使光路切断。 2）选定波长：根据实验要求，转动波长调节器，使指针指示所需要的单色光波长。 3)加样：比色杯中加入空白及待测样品，并放入分光光度计中，注意：加入样品量不超过比色杯体积的2/3。且比色杯放入仪器前，要将外壁擦干净。 空白对照管1，标准管2，测定管3;4）调模式为“透射比”：对空白对照进行调“0”（开盖）和调“100”（闭盖）。 5）调模式为“吸光度”：将仪表上“透光率T”调至“吸光率A”，轻轻拉动比色皿座架拉杆，使有色溶液进入光路，此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度OD。读数后，打开比色皿暗箱盖。 6）关机：实验完毕，，将比色皿取出洗净，放在滤纸上凉干。关闭仪器。; 注意事项1）为了防止光电管疲劳。不测定时必须将比色皿暗箱盖打开，使光路切断，以延长光电管使用寿命。2）比色皿的使用方法：①拿比色皿时，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。②测定有色溶液吸光度时，一定要用有色溶液洗比色皿内壁几次，以免改变有色溶液的浓度。另外，在测定一系列溶液的吸光度时，通常都按由稀到浓的顺序测定，以减小测量误差。;③比色皿外壁的水用擦镜纸或细软的吸水纸吸干，以保护透光面。 ④每次做完实验时，应立即洗净比色皿。清洗比色皿时，一般先用水冲洗，再用蒸馏水洗净。 不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗比色皿，以免损坏。也不能用毛刷清洗比色皿，以免损伤它的透光面。;实验原理;葡萄糖＋Cu2+;操作步骤;（2）取3支血糖管操作 ;1:4磷钼酸溶液加至25刻度处后，用塑料袋片盖住管口颠倒混匀，用空白管调“0”，在620nm波长处进行比色，读取各管光密度值。;（3）按以下公式计算葡萄糖含量： 兔正常血糖含量为：135+/-12mg/100ml;注意事项;