总RNA提取的原理、步骤.docx

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总提取的原理步骤原理及方法异硫氰酸胍酚氯仿一步法试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚其中异硫氰酸胍可裂解细胞促使核蛋白体的解离使与蛋白质分离并将释放到溶液中当加入氯仿时它可抽提酸性的苯酚而酸性苯酚可促使进入水相离心后可形成水相层和有机层这样与仍留在有机相中的蛋白质和分离开水相层无色主要为有机层黄色主要为和蛋白质简易步骤细胞或组织加入试剂后匀浆室温静置分钟加入试剂体积量的氯仿剧烈震荡混匀室温静置分钟离心分钟将上清液转移至新的离心管中加入与上清液等体积的异丙醇颠倒混匀室温静置分钟离心分钟弃上清向沉淀中

总RNA提取的原理、步骤 原理及方法(异硫氰酸胍-酚-氯仿 一步法) TRIZOL 试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白 体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯仿时,它可抽提酸性的苯酚, 而酸性苯酚可促使 RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层, 这样RNA与仍留在有机相中的 蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为 RNA有机层(黄色)主要为 DNA和蛋白质。 简易步骤 细胞或组织,加入 0.4ml TRIZOL试剂后匀浆 室温静置5分钟 加入1/5 TRIZOL试剂体积量的氯仿,剧烈震荡混匀 室温静置5分钟,12000g

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