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课件动物试验设计;选择合适本课题研究的动物的种属、品种品系、等级、年龄、性别、体重等
确定分组情况、每组的样本量和受试对象总数
;处理因素;确定处理因素注意事项
1. 抓住实验的主要因素
按所提出的假设目的和可能性确定单因素或多因素。
2. 确定因素的强度
处理因素的强度是因素的量的大小,如电刺激强度、药物剂量等,处理因素的强度应适当。同一因素有时可以设置几个不同的强度,如一个药设几个剂量;3. 处理因素的标准化
处理因素在整个实验过程中应保持不变,否则会影响实验结果的评价。
例如电刺激的强度(电压、持续时间、频率等)、药物的质量(纯度、纯度、生产厂家、批号、配制方法等)应一致。
4. 重视非处理因素的控制
非处理因素(干扰因素)可能会影响实验结果,应加以控制,如动物的年龄、性别、体重等。
;实验效应是指处理因素作用于受试对象后所起的作用,它通过实验指标来实现,也与实验方法有关。
;实验指标选择的基本条件:
特异性:
客观性:
灵敏度:
精确度:
可行性:
认可性:
;处理因素: 二氢杨梅素 脑缺血再灌注损伤
受试对象: 小鼠
实验效应:
行为学评分
脑含水量
脑梗死率
病理改变
抗氧化指标
;二、动物实验设计原则;定义:是要求在实验中设立可与实验组比较的对照组,用于消除各种无关因素影响。
种类
阴性对照
阳性对照
模型对照
自身对照
;阴性对照
包括空白对照、正常对照组、溶媒/辅料对照、假处理组等;阳性对照(标准对照)
使用已知的能达到预期阳性结果的处理因素作用于动物,其余非处理因素应与其它组一致。
如已知有效药物、公认标准疗法、机制相同或相似药物等
阳性对照的作用
1)检验试验体系是否正确,如果阳性对照未出现阳性结果,就应该检查试验体系的哪个环节出现问题
2)以阳性对照作为参照物,比较和评价实验组的阳性结果是高于还是低于阳性对照;模型对照
实验对照组是指在研究过程中,给对照组施加部分处理因素,但不是被研究的处理因素。
例如:研究药物对某一种病种或症???的治疗作用,常常采用一定的疾病动物模型。对动物模型的处理方法实验组和实验对照组完全相同,但是治疗组给予药物,而实验对照组不给予药物。
;自身对照。
同一个体身上观察实验处理前后某种指标的变化
同一动物在施加实验因素的一侧与不施加实验因素的另一侧作左右的对照。
自身对照可有效减少个体差异对试验处理反应的影响。凡可进行自身对照设计的实验尽尽量加以采用
;剂量对照组
在药理学和毒理学试验中,实验组还进一步分层多个剂量组,以此观察不同剂量的量效关系。不同剂量组也可视为剂量对照组。
;随机性原则;完全随机分配
选定同源的动物群体,生物特性一致的动物将动物编号后采用抽签法,或利用随机数字表或计算机程序随机分组
;分层随机分配
在随机分组前对可能明显影响实验的一些因素如性别、病情等先加以控制,这就是分层随机(均衡随机)。
例如将30只动物雌雄各半分为3组,可先把动物分为雌15只、雄15只,再将它们随机分为3组。
;重复性原则 ;最少样本数的确定;一致性原则;非处理因素包括
实验对象:动物品系、体重、年龄、性别
实验条件:饲料和饲养方式
实验环境:实验室温度、湿度、气压、季节
实验时间:
药品:药物厂商、批号、纯度、剂型、注射容量和速度、酸碱度、温度、给药途径和给药顺序
仪器设备:仪器种类、型号、灵敏度、精确度、零点漂移、电压稳定性
操作人员:操作步骤熟练程度
; 客观性原则;
如中医辨证“气虚”症状为面色苍白,头晕目眩、少气懒言,神疲乏力,甚则晕厥。在大小鼠中可用自发活动仪记录小鼠的自发活动情况、舌苔颜可用拍照和与标准色卡对比记录,并与正常对照组比较。;三 动物实验药物剂量的设计和换算;1) 根据有关文献、实验教材、实验参考书提供的药物剂量。
由于药物批号不同、动物、环境条件的差异,必要时通过预备实验调整用药剂量。
2) 根据临床常用有效剂量换算成实验动物剂量。
3) 以小鼠中毒剂量或致死剂量的1/5或1/10作为试用剂量。
4) 参考结构和作用相似的已知药物剂量作为试用剂量
;5)按等比关系设立至少3个剂量组进行动物实验
6)考虑动物种属,年龄,给药途径调整给药剂量。
用大动物进行实验时,开始的剂量可采用给鼠类剂量的1/15-1/2,以后可根据动物的反应调整剂量。
一般说确定的给药剂量是指成年动物的,如是幼小动物,剂量应减少。
;
因给药途径不同,所用剂量也不同,以口服量为100时,灌肠量应为100-200,皮下注射量30-50,肌肉注射量为25-30,静脉注射
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