His标签蛋白纯化试剂盒（可溶性蛋白）.pdfVIP

微信订购：扫一扫右侧二维码 网站订购： 服务热线：4006-222-360 版本号：12/2015 6×His-Tagged Protein Purification Kit (Soluble Protein) His标签蛋白纯化试剂盒（可溶性蛋白） 目录号：CW0894S （5 ml） 保存条件：Protease Inhibitor Cocktail，-20℃；Ni-Agarose Resin，2-8℃，避免冷冻； 其它组分，2-8℃ 产品内容 CW0894S Component 5 ml Ni-Agarose Resin 5 ml Bacterial Protein Extraction Reagent 65 ml 1 M Tris-HCl （pH7.9 ） 15 ml 1 M Imidazole 65 ml 3 M NaCl 120 ml Protease Inhibitor Cocktail 700 μl Affinity Column (12 ml) 1 set 产品简介 　　本试剂盒包含Ni-Agarose填料、亲和柱空柱以及可溶性His融合蛋白纯化所需的全部试 剂（细菌裂解液、蛋白酶抑制剂混合物、结合缓冲液和洗脱缓冲液组分），使用方便。该 镍柱纯化系统对6×His-tag蛋白具有显著特异吸附能力，能够高效一步纯化带有6个组氨酸 亲和标签的蛋白。该系统具有4个Ni2+螯合位点，较只有3个螯合位点的Ni-IDA结合Ni2+ 更 2+脱落且增强对His标签蛋白的结合能力，提高纯化效率。 为牢固，有效防止纯化过程中Ni 较高的基团密度，大大提高了蛋白载量。该系统在天然或变性条件下，对来源于各种表达 系统（如杆状病毒，哺乳细胞，酵母以及细菌）中的His标签蛋白，均有很好的纯化效果。 本产品已螯合镍离子，可直接用可溶性蛋白的纯化，使用方便，快捷。 支持物： CL-6B琼脂糖凝胶 载量： 20-30 mg His标签蛋白/ml填料 粒径： 50-160 μm 注意事项 1．在纯化之前采用电泳检测蛋白的可溶性，本试剂盒只适合于可溶性蛋白的纯化，如需 纯化包涵体蛋白，请选择我公司的包涵体蛋白纯化试剂盒，货号为CW0893。 2 ．缓冲液中不建议使用 β-巯基乙醇、DTT和EDTA。 3．整个纯化过程中切忌凝胶脱水变干。 4 ．为提高纯化效率，首先确定Binding Buffer和Elution Buffer中咪唑的最佳使用浓度。必 要时可以使用线性或梯度浓度的咪唑浓度，Binding Buffer的范围为0-10 mM，洗脱缓冲 液的范围为10-500 mM来进行。并通过SDS或Western Blotting来检测目的蛋白 的纯度。 5．请使用高纯度的试剂配制缓冲液，并通过0.22 µm或者0.45 µm过滤器过滤。为避免柱 子被堵塞，建议将裂解液进行离心，或者使用0.22 µm或者0.45 µm过滤器过滤。 6 ．柱再生时，保证每步洗完后都要用足够的去离子水冲洗至中性。 1 操作步骤 I 缓冲液的准备 Component Tris-HCl （pH7.9 ） Imidazole NaCl Solu