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实验方法总结（2）：细胞生物学部分 1. 原代细胞分离与培养 1.1 原代细胞分离 人或动物体内（或胚胎组织）由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培 养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。 第一， 悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，最简单的方法是采用 1000r/min 的低速离心 10 min。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液 中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 第二， 实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成 细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法 。其中，机械分散法的 特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤 维成分少的软组织。而消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用 酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松， 由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中 振荡，使细胞团块得以较充分的分散 ，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞 悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。 1.2 原代细胞培养 原代细胞的培养也叫初代培养，是从供体取得组织细胞在体外进行的首次培养， 是建立细胞系的第一步。 第一， 组