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引物设计常见问题与解答二长链引物为什么出错的几率非常高答引物合成时每一步反应效率都不能达到产生碱基插入缺失置换突变的因素客观条件都有一直存在引物链越长突变的频率累加起来就越高研究人员总希望合成的引物万无一失这种心情可以理解但是犹如扩增不可能绝对保证扩增产物中没有突变引物合成也不可能保证正确要知道引物合成中发生错误非人为因素的频率比任何高保真高温聚合酶扩增过程所产生的频率都要高做引物合成长链引物合成您要有引物中部分引物可能有突变的思想准备如果测序发现突变该如何处理答对您遇到的困惑我们表示同情遇到这
引物设计常见问题与解答 ( 二)
长链引物为什么出错的几率非常高?
答:引物合成时,每一步反应效率都不能达到 100%,产生碱基插入,缺失,置换突变的因素客观条件都有
一直存在。引物链越长,突变的频率累加起来就越高。研究人员总希望合成的引物万无一失,这种心情可 以理解。但是犹如 PCR扩增,不可能绝对保证扩增产物中没有突变,引物合成也不可能保证 100%正确。
要知道,引物合成中发生错误(非人为因素)的频率,比任何高保真高温聚合酶 PCF扩增过程所产生的频
率都要高。做引物合成,长链引物合成,您要有引物中部分引物可能有突变的思想准备。
如果测序发现突变,该如何处理?
答:对您遇到的困惑,我们表
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