耐力训练对大鼠肝脏股四头肌谷胱甘肽抗氧化系统酶活性的影响.doc

耐力训练对大鼠肝脏,股四头肌谷胱甘肽抗氧化系统酶活性的影响 耐力训练对大鼠肝脏,股四头肌谷胱甘肽抗 氧化系统酶活性的影响 中国应用生理学杂志1999;15(1 耐力训练对大鼠肝脏,股四头肌 谷胱甘肽抗氧化系统酶活性的影响 ……31000 许 ~,,…育系(浙江省体科所,杭_州华东师范大学体育系 ] f 55 摘要目的和方法:本文通过拴刹太鼠肝脏,股四头肌中GSH—Px,各胱甘肤转硫酶(GST),各胱甘肤还原酶(GR)活 性噩脂质过氧4~(LVO)产物丙=-~(MDA)的舍量变化,观察耐力训练对太鼠机体产生内源性自由基噩各胱甘肽抗 氧化系统酶活性的影响.结果:sD雄性太鼠经1l周跑台训练后,安静状态时肝脏中MDA舍量下降,GSH-Px,GSH 活性下降,股四头肌中GSH—Px,GST活性升高;90min定量负荷运动使太鼠肝脏中MDA舍量升高,GSH-Px,GST, GR活性均下降,但训练纽GSH-Vx,GST活性恢复较快.结论:太鼠经 耐力训练后提高了谷胱甘肽挠氧化系统酶的 抗氧化功能,表现了良好的运动适应性,且恢复较快.值得注意的是训 练蛆太鼠GR活性在运动后恢复期存在下 降趋势.其机理有待进一步研究. 关键词 — GS— T上amp;m点 随着国内外运动医学界对自由基的研究不断深 人,运动疲劳的自由基学说也得到了进一步证实,学 术界普遍认为,衰竭性运动使机体产生大量的自由 基,继而引发脂质过氧化(LPO)反应,破坏组织,器 官的结构和功能,造成机体的代谢紊乱,进而促进运 动疲劳的发生. 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH.Px),谷胱甘肽转硫 酶(GST),谷胱甘肽还原酶(GR)是谷胱甘肽抗氧化 系统中主要的酶,在机体清除自由基的过程中起着 十分重要的作用.曾有报道体外实验证明GSH-Px 在防止自由基损伤中的作用比超氧化物岐化酶和过 氧化氢酶大…1,尤其过氧化氢酶只局限于脂质小体 内. 本文旨在通过检测大鼠肝脏,股四头肌中 GSH-Px,GST,GR的活性及脂质过氧化产物丙i--醛 (MDA)含量的变化,观察耐力训练能否提高大鼠抗 氧化损伤的能力,从而探索体育锻炼的积极意义及 作用机理. 1材料与方法 1.1动物 2个月龄SD雄性大鼠37只,饲料均由上海西 普尔必凯实验动物有限公司提供. 1.2试剂 本实验中所用试剂均为分析纯,其中CDNB, GSH,GSSG由东京化成进口,NADPH,GR,11,P由 美国SIGMA公司进口,考马氏亮蓝G250由FLU— KA进口分装. 1.3动物实验 l_3.1训练方法经跑台预跑试验选择具有正常 跑台运动能力的大鼠,随机分为训练组(19)和对照 组(培),训练组大鼠在P2022型改装的动物跑台上 运动,第一周进行30min/d,速度23m/min,坡度 5%,5d/周的训练,以后每周延长跑时10min至60 min/d,速度增至25m/min,共训练l1周,实验时随 机分为安静组(Rest),运动后即刻组(Exercised),运 动后8h组(Recovered).对照组在同等条件下饲 养,不进行任何体力活动,随机分为相应三组. l_3.2定量负荷运动实验大鼠在末次训练后60 h进行实验.定量运动的负荷为:运动持续时间90 rain,速度30m/rain,坡度10%的跑台运动. 1.3.3蛆织匀浆的制备将大鼠断头处死,取肝 脏,股四头肌用生理盐水洗净,称量,按l:9(w/v) 加人TRIS-HCL(pH=7.4)缓冲液,用组织捣碎机 匀浆,采用高速冷冻离心机以600g离心10rain, 取上清液待测,以上操作均在冰浴中进行. 1.4检测指标 1.4.1GSH-Px.GR活性的测定L2按Beutler的 分光光度计法测定,活性单位以IU/mgpro表示. l_4.2GST活性的测定L3J按Habig等人的分光 光度计法测定,在25?下每分钟形成l微克分子 1.硫.2,4一二硝基苯谷胱甘肽作为该酶的1个活性 单位. 1.4.3MDA含量测定L按向荣等人的LPO的 改良法测定,浓度以pxr~l/mgpro表示. *19971o-27收穑1998—03—26修回 1.4.4蛋白定量[按Bradford的考马亮蓝法测 定. 1.5数据处理 本实验结果采用小样本t检验作显着性比较, 数据均以?S形式表示. 2结果 2.1GStI-PX活性的变化 耐力训练后安静状态时大鼠肝脏中GSH.PX 活性较对照组低,定量负荷运动后则较对照组高,90 min定量负荷运动使大鼠肝脏,股四头肌中GSH- ChinJA9dPhvsiol1999;15(1