IgM ( ACA-IgM )酶联免疫分析试剂盒 使用说明书(2).pdfVIP

/file/1778969 From ManualL ManualL collects and classifies the global product instrunction manuals to help users access anytime and anywhere, helping users make better use of products. Home: / Chinese: / This Manual: /file/1778969 小鼠抗心磷脂抗体IgM（ACA-IgM）酶联免疫分析试剂盒 使用说明书 本试剂盒仅供体外研究使用! 预期应用 ELISA 法定量测定小鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中抗心磷脂抗体IgM （ACA-IgM）含量。 实验原理 用纯化的抗原包被微孔板，制成固相载体，往包被抗原的微孔中依次加入标本或标准品、生 物素化的抗原、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB 显色。TMB在过氧化物 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的ACA- IgM 呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。 试剂盒组成及试剂配制 1.酶联板：一块（96 孔） 2.标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10 分钟以 上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为400 U/ml，请先稀释至100 U/ml，再做系列倍 比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释）后，分别稀释成100 U/ml，50 U/ml，25 U/ml，12.5 U/ml，6.25 U/ml，3.12 U/ml，1.56U/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 U/ml，临用前15 分钟内配制。如配制50 U/ml标准品：取0.5ml （不要少于0.5ml ） 100 U/ml 的上述标准 品加入含有0.5ml 样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 3.样品稀释液：1×20ml。 4.检测稀释液A：1×10ml。 5.检测稀释液B：1×10ml。 6.检测溶液A：1×120μl（1:100）临用前以检测稀释液A 1:100 稀释，稀释前根据预先计算 This Manual: /file/1778969 好的每次实验所需的总量配制（100μl/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl 检测溶 液A加990μl 检测稀释液A 的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。 7.检测溶液B：1×120μl/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B1:100 稀释。稀释方法同检测溶 液A。 8.底物溶液：1×10ml/瓶。 9.浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10. 终止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。 11. 覆膜：5 张 12. 使用说明书：1 份 自备物品 1. 酶标仪（建议参考仪器使用说明提前预热） 2. 微量加液器及吸头，EP 管 3. 蒸馏水或去离子水，全新滤纸 标本的采集及保存 1.血清：全血标本请于室温放置2 小时或4℃过夜后于1000 x g 离心20 分钟，取上清即可 检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反