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第 2章 染色体与 DNA
名词解释
原癌基因: 细胞内与细胞增殖相关的正常基因,是维持机体正常生命活动所必须的,在进化上高等保守。
当原癌基因的结构或调控区发生变异,基因产物增多或活性增强时,使细胞过度增殖,从而形成肿瘤。
半保留复制: 以亲代 DNA双链为模板以碱基互补方式合成子代 DNA,这样新形成的子代 DNA中,一条链来自亲代 DNA,而另一条链则是新合成的,这种复制方式叫半保留复制。填空题
3.在聚合酶链反应中,除了需要模板 DNA 外,还需加入引物、
4.引起 DNA 损伤的因素有自发因素、物理因素、化学因素。
DNA
聚合酶、
dNTP
和镁离子。
5.DNA
复制时与
DNA
解链有关的酶和蛋白质有拓扑异构酶Ⅱ、解螺旋酶、单链
DNA
结合蛋白。
6.参与 DNA 切除修复的酶有 DNA 聚合酶Ⅰ、 DNA 连接酶、特异的核酸内切酶。
7.在真核生物中 DNA 复制的主要酶是 DNA 聚合酶δ。在原核生物中是 DNA 聚合酶Ⅲ。
8.端粒酶是端粒酶是含一段 RNA的逆转录酶。
9.DNA 的修复方式有错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复、
DNA的直接修复。
简述
DNA复制的过程
DNA
的复制过程可被分为
3 个阶段,即复制的起始、延伸和终止。每个
DNA复制的独立单元主要包
括复制起始位点和终止位点。
DNA 复制的起始包括预引发和引发两个阶段。在预引发阶段, DNA解旋解链,形成复制叉,引发体
组装;在引发阶段, 在引发酶的催化下以 DNA链为模板合成一段短的 RNA引物。复制时 DNA链的延伸由 DNA
聚合酶催化,以亲代 DNA链为模板,引发体移动,从 5′→ 3′方向聚合子代 DNA链。当子链延伸到达终止
位点是, DNA复制就终止了,切除 RNA引物,填补缺口,在 DNA连接酶的催化下将相邻的冈崎片段连接起
来形成完整的 DNA长链。
试述真原核生物的 DNA复制的特点的不同之处
①真核生物染色体有多个复制起点,多复制眼,呈双向复制,多复制子。原核生物的染色体只有一个
复制起点,单复制子也呈双向复制。
②真核生物冈崎片段长约 200bp 比原核生物略短。真核生物 DNA复制速度比原核慢,速度为 1000 ~
3000bp/min( 仅为原核生物的 1/20 ~ 1/50 )。
③真核生物复制的终止在端粒处,原核生物的复制叉相遇时即终止。
④真核生物染色体在全部复制完之前起点不再重新开始复制;而在快速生长的原核生物染色体 DNA复
制中,起点可以连续发动复制。真核生物快速生长时,往往采用更多的复制起点。
⑤真核生物有多种 DNA聚合酶, DNA聚合酶δ是真正的复制酶,在
PCNA称为增殖细胞核抗原,相当于大肠杆菌 DNA聚合酶Ⅲ的β - 夹子,
PCNA存在下有持续的合成能力。
RFC蛋白相当于夹子装配器。
原核生物的
DNA聚合酶有三种
DNA聚合酶Ⅲ
DNA的真正复制酶:多亚基酶,含十种亚基,该酶
DNA合
成的持续能力强。
⑥真核生物线性染色体两端有端粒结构,它是由许多成串的重短复序列组成,端粒功能是稳定染色体
末段结构,防止染色体间的末端连接,并可补偿滞后链 5’ - 末段在消除 RNA引物后造成的空缺,使染色体
保持一定长度。端粒酶是含一段 RNA的逆转录酶。
RPA:真核生物的单链结合蛋白; RNaseH1和 MF-1 切除 RNA引物, DNA聚合酶ε填补缺口。简述半保留复制的生物学意义
DNA 的复制过程(以大肠杆菌为例)
复制起始:
( 1
)、拓扑异构酶解开超螺旋。
( 2
)、 Dna A 蛋白识别并在 ATP 存在下结合于四个
9bp 的重复序列。
( 3
)、在类组蛋白( HU 、 ATP 参与下 , Dan A 蛋白变性 13 个 bp 的重复序列 ,形成开链复合物。
( 4) 、 Dna B 借助于水解 ATP 产生的能量在 Dna C 的帮助下沿 5’→ 3’方向移动,解开 DNA 双链,形
成前引发复合物。
( 5)、单链结合蛋白结合于单链。
( 6)、引物合成酶(
Dna G
蛋白)开始合成
RNA
引物。
链的延长(冈崎片段的合成):
在 DNA 聚合酶Ш的催化下,以四种
5’-脱氧核苷三磷酸为底物,在
RNA
引物的
3’端以磷酸二酯键连接上
脱氧核糖核苷酸并释放出焦磷酸。
DNA
链的延伸同时进行前导链和滞后链的合成。两条链方向相反。
6、 PCR 的基本原理?
PCR
是在试管中进行的
DNA
复制反应,基本原理是依据细胞内
DNA
半保留复制的机理,以及体外
DNA
分子于
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