绪论2019年下半年.ppt

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绪 论 ? 一、组织学与胚胎学的 研究内容 ? 二、组织学与胚胎学的 发展简史 ? 三、组织学与胚胎学的 研究技术 ? 四、组织学与胚胎学的 常用术语 ? 五、组织学与胚胎学的 学习方法 一 、 组织学与胚胎学的 研究内容 组织学( histology ):研究机体 微细结构 及其相关功能的科学 。 胚胎学( embryology ):研究个体发生、 生长、发育机 制的科学。 2 、胚胎学研究内容: 1 、组织学研究内容: 细胞 上皮组织 结缔组织 肌肉组织 神经组织 组织 个体 胚 ( 2~8 周 ) 胎 ( 9~38 周 ) 精子 卵子 受精卵 胚前 胚胎 胚后 器官 系统 个体 ? 了解内容 ? 自学 二 、 组织学与胚胎学的 发展简史 三 、 组织学与胚胎学 研究技术 问题 解决方法 观察对象太小 放大 显微镜 观察对象无色,无反差 染色 ( HE 染色 ) 观察对象生化成分不同 细胞化学 、 免疫组织化学 观察对象是活体 培养 1 、组织切片技术 ? 石蜡切片 制作技术: ? 取材和固定 ? 脱水和透明 ? 浸蜡和包埋 ? 切片和贴片 ? 染色与封固 HE staining ? Hematoxylin 苏木精 :basic dye, purple-blue ? Eosin 伊红 : acid dye, pink 二甲 苯 1 二甲 苯 2 100% 酒精 100% 酒精 95% 酒精 95% 酒精 85% 酒精 75% 酒精 二甲 苯 2 二甲 苯 1 100% 酒精 100% 酒精 95% 酒精 95% 酒精 85% 酒精 75% 酒精 苏木 精染 色液 盐酸 酒精 伊红 染色 液 水 洗 水 洗 在染色缸中 ? Frozen section (冰冻切片) ? Better for preserving chemical components(e.g. enzymes) ? Freezing → cryotome → staining 2 、组织化学技术 ( 1 )、一般组织化学技术: ? PAS 反应: 糖, 紫红色 ? 油红 O : 脂滴, 红色 ? 甲基绿-焦宁: DNA , 蓝紫色 RNA , 红色 PSA 反应: 过碘酸雪夫氏反应 (periodic acid Schiff reaction) : 简称 PAS 反应 , 是确定组织或细胞中有无多糖存在的一种方法 。 原理 : 多糖 PA 氧化 醛 Schiff 试剂 ( 亚硫品红 ) 紫红色沉淀 猫小肠 PAS 染色示杯状细胞 (复旦大学上海医学院组织胚胎学教研室供图) ( 2 )、免疫细胞(组织)化学技术 利用抗原 ( antigen, Ag ), 抗体 ( antibody ) 特异 结合的原理 , 用已知抗体检测未知抗原的一种方法 。 (辣根过氧化物酶) (过氧化物酶-抗过氧化物酶复合法,简称 PAP 法) (peroxidase-antiperoxidase complex method,PAP) (抗生物素(卵白素)-生物素法,简称 ABC 法) (avidin biotin complex method,ABC) ( 链霉亲和素-生物素化酶复合法,简称 SABC 法 ) (strept avidin-biotin complex,SABC) 链霉亲和素 , 即链霉素抗生物素蛋白 strept avidin , SA 3 、活体组织研究技术 ? 组织培养(体外实验 in vitro )

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